Question

19．農業生產上有一種廣泛使用的除草劑在土壤中不易被降解，長期使用會污染土壤．為修復被污染的土壤，可按圖示程序選育出能降解該除草劑的細菌．已知該除草劑（含氮有機物）在水中溶解度低，含一定量該除草劑的培養基不透明．
（1）微生物接種是微生物學研究中最常用的基本操作技術，該技術的核心是無菌操作，應該在酒精燈火焰旁完成．圖1中B、C所示操作的目的是將聚集的菌種逐步稀釋獲得單個菌落．
（2）在選育過程中，應將土壤浸出液接種于以該除草劑為唯一氮源的固體培養基上．為了篩選出高效的目的菌，可比較單菌落周圍透明圈的大小．實驗結果如圖2顯示的A～E五種菌株中，E是最理想菌株．
（3）若想對初步篩選得到的目的菌進行純化并計數，可采用的接種方法是稀釋涂布平板法．對分離的細菌數目統計時，統計的菌落數目往往比活菌的實際數目少．
（4）操作過程中有三種材料或用具需要消毒或滅菌：①培養細菌用的培養基與培養皿；②操作者的雙手；③玻棒、試管、燒瓶和吸管．其中需要滅菌的是①③．（填序號）

Answer 1

分析 1、消毒和滅菌：

	消毒	滅菌
概念	使用較為溫和的物理或化學方法殺死物體表面或內部的部分微生物（不包芽孢和孢子）	使用強烈的理化因素殺死物體內外所用的微生物（包括芽孢和孢子）
常用方法	煮沸消毒法、巴氏消毒法、化學藥劑消毒法、紫外線消毒法	灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌
適用對象	操作空間、某些液體、雙手等	接種環、接種針、玻璃器皿、培養基等

2、分析題圖：該實驗是從土壤中篩選分離能降解除草劑的微生物的過程．該實驗要將土壤稀釋處理，以除草劑為唯一氮源的培養基篩選土壤微生物，以菌落計數法進行統計計數．

解答 解：（1）微生物接種技術的核心是無菌操作，應該在酒精燈火焰旁完成．圖1中B、C所示為平板劃線操作，其目的是將聚集的菌種逐步稀釋獲得單個菌落．
（2）要選育出能降解該除草劑的細菌，應將土壤浸出液接種于以該除草劑為唯一氮源的固體培養基上．為了篩選出高效的目的菌，可比較單菌落周圍透明圈的大小，透明圈越大，說明其中的細菌降解除草劑的能量越強，因此圖2顯示的A～E五種菌株中，E是最理想菌株．
（3）純化微生物的方法包括平板劃線法和稀釋涂布平板法，其中稀釋涂布平板法可以對微生物進行計數，用該方法對分離的細菌數目統計時，有些細菌靠在一起，形成一個菌落，這樣統計的菌落數往往比活菌的實際數目少．
（4）①培養細菌用的培養基與培養皿需要滅菌；②操作者的雙手需要消毒；③玻棒、試管、燒瓶和吸管需要滅菌．
故答案為：
（1）無菌操作　酒精燈火焰　稀釋獲得單個菌落
（2）該除草劑　E　
（3）稀釋涂布平板法　少　
（4）①③

點評 本題考查微生物的分離和培養，要求考生識記無菌技術，掌握消毒和滅菌的區別；識記接種微生物常用的方法，能結合圖中信息準確答題，屬于考綱識記和理解層次的考查．