Question

10．人組織纖溶酶原激活物（htPA）是一種重要的藥用蛋白，可在轉htPA基因母羊的羊乳中獲得．流程如下：

（1）卵母細胞可以從活體輸卵管中采集，還可以從已處死的雌羊卵巢中獲�。畬�供體母羊用促性腺激素獲能處理，使其超數排卵．采集的精子需要經過獲能（處理），才具備受精能力．
（2）欲用有限的早期胚胎獲得多個轉基因個體，可以利用胚胎分割技術．由于代孕母羊對移入其子宮的外來胚胎基本不發生免疫排斥反應，才使早期胚胎能再代孕母羊體內存活．
（3）質粒上應有htPA基因具有的限制酶切點，才能使htPA基因插入其中．在轉htPA基因母羊的肌肉細胞中能（能、不能）檢測到目的基因．若在其羊乳中檢測到htPA，說明目的基因成功表達．

Answer 1

分析 1、DNA重組技術至少需要三種工具：限制性核酸內切酶（限制酶）、DNA連接酶、運載體．
2、目的基因分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術．
3、該基因工程需要對羊的性別進行選擇，由于只有母羊能夠分泌乳汁，因此選擇母羊的胚胎進行移植．

解答 解：（1）卵母細胞可以從活體輸卵管中采集，還可以從已處死的雌羊卵巢中獲取．為獲取更多的卵（母）細胞，要對供體母羊注射促性腺激素，使其超數排卵．采集的精子需要經過獲能（處理），才具備受精能力．
（2）欲用有限的早期胚胎獲得多個轉基因個體，可以利用胚胎分割技術．由于代孕母羊對移入其子宮的外來胚胎基本不發生免疫排斥反應，才使早期胚胎能再代孕母羊體內存活．
（3）質粒上應有htPA基因具有的限制酶切點，才能使htPA基因插入其中．由于受精卵進行的是有絲分裂，因此分裂產生的子細胞中均含有目的基因．若在其羊乳中檢測到htPA，說明目的基因成功表達．
故答案為：
（1）輸卵管       促性腺激素     獲能
（2）胚胎分割     基本不發生免疫排斥反應
（3）htPA基因具有的限制酶切點   能     htPA

點評 本題考查了基因工程和胚胎工程的相關知識，要求考生能夠識記基因工程的操作步驟；明確該基因工程中需要選擇母羊進行胚胎移植；識記細胞全能性的概念等．要求考生具有扎實的基礎知識，難度適中，屬于考綱中識記、理解層次的考查．