Question

14．我國家電研究院的洗衣機專家指出，洗衣機內部的環境非常潮濕，洗衣機使用時間越長，內部滋生微生物的機會就越大．看似干凈的洗衣機其實內部隱藏著一個健康的隱形殺手．某生物興趣小組的同學，利用內桶背面的污垢進行了相關實驗．如圖是某同學分離和培養洗衣機中微生物的部分操作步驟和實驗結果示意圖．

（1）圖1所示的是制備固體培養基時的實驗操作步驟之一，該操作稱為倒平板，若用該培養基培養洗衣機中滋生的細菌時，除考慮各種營養條件外，還要考慮溫度、pH、氧氣、無菌等和滲透壓等條件（至少寫兩個）．
（2）在培養洗衣機中細菌的實驗中，應在接種前檢測固體培養基是否被污染，具體檢測的方法是將未接種的培養基在適宜的環境中放置一段時間，觀察培養基上是否有菌落產生．
（3）圖2是平板劃線法接種操作示意圖，操作順序是A→B→E→D→C→F（用字母和箭頭表示）；以上操作中存在錯誤的步驟是C（用字母表示）．
（4）將以上接種后的平板置于培養箱中培養時需倒置，原因是防止皿蓋上凝結的水珠落入培養皿造成污染．
（5）在檢測洗衣機的污垢中是否含微生物時，也有同學先將污垢制成一定濃度的水樣溶液，然后用移液槍取0．lmL菌液滴入平板，并用涂布器涂布到固體培養基的表面進行培養，這種方法稱為稀釋涂布平板法．經一段時間培養后，該同學統計發現該培養皿中共有57個菌落（如圖3），他得出的結論是0．lml菌液中有57個細菌，你認為他的判斷是否正確，說明原因．不正確，應大于或等于57個細菌，因為當兩個或多個細菌連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落．
（6）實驗結束后，使用過的培養基應該進行滅菌處理才能倒掉，此目的是防止造成環境污染．

Answer 1

分析 分析圖1：圖示表示倒平板過程．
分析圖2：平板劃線操作：①挑取他含菌樣品：選用平整、圓滑的接種環，按無菌操作法挑取少量菌種．②劃A區：將平板倒置于煤氣（酒精）燈旁，左手拿出皿底并盡量使平板垂直于桌面，有培養基一面向著煤氣燈（這時皿蓋朝上，仍留在煤氣燈旁），右手拿接種環先在A區劃3-4條連續的平行線（線條多少應依挑菌量的多少面定）．劃完A區后應立即燒掉環上的殘菌，以免因菌過多而影響后面各區的分離效果．在燒接種環時，左手持皿底并將其覆蓋在皿蓋上方（不要放入皿蓋內），以防止雜菌的污染．③劃其他區：將燒去殘菌后的接種環在平板培養基邊緣冷卻一下，并使B區轉到上方，接種環通過A區（菌源區）將菌帶到B區，隨即劃數條致密的平行線．再從B區作C區的劃線．最后經C區作D區的劃線，D區的線條應與A區平行，但劃D區時切勿重新接觸A、B區，以免極該兩區中濃密的菌液帶到D區，影響單菌落的形成．隨即將皿底放入皿蓋中．燒去接種環上的殘菌．④等平板凝固后，將平板倒置．因此，正確的順序為A→B→E→D→C→F．
分析圖3：圖3采用的是稀釋涂布平板法．

解答 解：（1）圖1所示是倒平板過程；若用該培養基培養洗衣機中滋生的細菌時，除考慮各種營養條件外，還要考慮溫度、pH、氧氣、無菌等和滲透壓等條件．
（2）檢測固體培養基是否被污染的方法是：將未接種的培養基在適宜的環境中放置一段時間，觀察培養基上是否有菌落產生．
（3）圖2是平板劃線法接種操作示意圖，由以上分析可知，其操作順序是A→B→E→D→C→F；為了防止雜菌污染，接種應該在酒精燈的火焰旁進行，因此以上操作中存在錯誤的步驟是C．
（4）為了防止皿蓋上凝結的水珠落入培養皿造成污染，需要將以上接種后的平板置于培養箱中培養時需倒置．
（5）在檢測洗衣機的污垢中是否含微生物時，也有同學先將污垢制成一定濃度的水樣溶液，然后用移液槍取0．lmL菌液滴入平板，并用涂布器涂布到固體培養基的表面進行培養，這種方法稱為稀釋涂布平板法．采用該方法計數時，當兩個或多個細菌連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落，因此計數的結果比實際值偏小．
（6）實驗結束后，使用過的培養基應該進行滅菌處理才能倒掉，此目的是防止造成環境污染．
故答案為：
（1）倒平板      溫度、pH、氧氣、無菌等
（2）將未接種的培養基在適宜的環境中放置一段時間，觀察培養基上是否有菌落產生
（3）E→D→C→F       C
（4）防止皿蓋上凝結的水珠落入培養皿造成污染
（5）稀釋涂布平板法        不正確，應大于或等于57個細菌，因為當兩個或多個細菌連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落
（6）防止造成環境污染

點評 本題結合圖解，考查微生物的分離和培養，要求考生識記接種微生物常用的兩種方法；識記無菌技術，能正確分析題圖，再結合所學的知識準確答題．