Question

2011年11月，武漢大學的科學家將人的血清白蛋白基因導入水稻體內合成了人的血清白蛋白，這種蛋白質的生理活性和人體自然產生的這類物質是完全一致的．結合圖示回答轉基因水稻培育過程的相關問題．

（1）限制酶MunⅠ和限制酶EcoRⅠ的識別序列及切割位點分別是-C^↓AATTG-和-G^↓AATTC-．為保證重組質粒表達載體的準確構建，用

 

切割質粒，用

 

切割含目的基因的DNA分子，用

 

連接目的基因和質粒．
（2）②過程將目的基因導入受體細胞的方法稱為

 

．
（3）③經歷的生理過程主要有

 

和

 

兩個階段．培育出轉基因水稻完整個體所依據的生物學原理是

 

．
（4）基因工程的最后步驟是目的基因的檢測與鑒定，在此步驟可對培育的植株進行分子水平的檢測，可檢測的物質有

 

、

 

、

 

．

Answer 1

考點：基因工程的原理及技術

專題：

分析：分析題圖：圖示為轉基因水稻培育過程圖，其中①為基因表達載體的構建過程，該過程需要限制酶和DNA連接酶；②表示將基因表達載體導入受體細胞；③表示采用植物組織培養技術將水稻細胞培養成轉基因水稻．

解答： 解：（1）由圖可知，目的基因兩側都是限制酶EcoRⅠ的切割位點，因此應選用限制酶EcoRⅠ切割含有目的基因的外源DNA分子；質粒中含有限制酶MunⅠ和限制酶EcoRⅠ的切割位點，但EcoRⅠ的切割位點位于標記基因中，用其切割會破壞標記，因此為保證重組質粒表達載體的準確構建，應選用限制酶MunⅠ切割質粒，再用DNA連接酶連接目的基因和質粒形成重組質粒．
（2）②是將目的基因導入受體細胞的過程，當受體細胞是植物細胞時，常采用農桿菌轉化法．
（3）③是將受體細胞培育成轉基因植株的過程，該過程需要采用植物組織培養技術，其原理是細胞的全能性．植物組織培養包括脫分化和再分化兩個階段．
（4）基因工程的最后步驟是目的基因的檢測與鑒定，在此步驟可對培育的植株進行分子水平的檢測，可采用DNA分子雜交技術檢測受體細胞受否含有人血清白蛋白基因，用分子雜交技術檢測人血清白蛋白基因是否轉錄出的mRNA，用抗原-抗體雜交技術檢測人血清白蛋白基因是否翻譯形成血清白蛋白．
故答案為：
（1）限制酶MunⅠ限制酶EcoRⅠDNA連接酶
（2）農桿菌轉化法
（3）脫分化　再分化　細胞的全能性
（4）人血清白蛋白基因　人血清白蛋白基因轉錄出的mRNA　人血清白蛋白

點評：本題結合轉基因水稻的培育過程圖，考查基因工程和植物組織培養的相關知識，要求考生識記基因工程的原理、工具、操作步驟及應用，能準確判斷圖中各過程的名稱，并能根據圖中信息選擇合理的限制酶；識記植物組織培養過程及原理，再結合所學的知識答題．