Question

5．某同學用新鮮的泡菜濾液為實驗材料純化乳酸菌．分離純化所用固體培養基中因含有碳酸鈣而不透明，乳酸菌產生的乳酸菌能溶解培養基中的碳酸鈣．回答下列問題：
（1）分離純化乳酸菌時，首先需要用無菌水對泡菜濾液進行梯度稀釋，進行梯度稀釋的理由是泡菜濾液中菌的濃度高，直接培養很難分離得到單菌落．
（2）推測在分離純化所用的培養基中加入碳酸鈣的作用有中和乳酸菌代謝過程中產生的乳酸和利于乳酸菌的識別和分離．分離純化時應挑選出在平板上有透明圈的菌落作為候選菌．
（3）乳酸菌在-20℃長期保存時，菌液中常需要加入一定量的甘油（填“蒸餾水”、“甘油”或“碳酸鈣”）．

Answer 1

分析 （1）泡菜的制作原理
泡菜的制作離不開乳酸菌．在無氧條件下，乳酸菌將葡萄糖分解成乳酸．
（2）測定亞硝酸鹽含量的原理
在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發生重氮化反應后，與N1萘基乙二胺鹽酸鹽結合形成玫瑰紅色染料．將顯色反應后的樣品與已知濃度的標準液進行目測對比，可以大致估算出亞硝酸鹽的含量．
（3）泡菜的制作

（2）亞硝酸鹽含量的測定操作過程

解答 解：（1）分離純化乳酸菌時，首先需要用無菌水對泡菜濾液進行梯度稀釋；進行梯度稀釋的理由是在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的乳酸菌將被分散成單個細胞，從而能在培養基表面形成單個的菌落．
（2）在分離純化所用的培養基中加入碳酸鈣的作用是中和乳酸菌代謝過程中產生的乳酸和利于乳酸菌的識別和分離；分離純化時應挑選出在平板上有透明圈的菌落作為候選菌．
（3）乳酸菌在-20℃長期保存時，菌液中常需要加入一定量的甘油．
故答案為：（1）無菌水 泡菜濾液中菌的濃度高，直接培養很難分離得到單菌落
（2）中和乳酸菌代謝過程中產生的乳酸 利于乳酸菌的識別和分離  在平板上有透明圈
（3）甘油

點評 本題主要以泡菜的制作為前提，考生微生物應用的相關知識，意在考查考生把握知識間內在聯系的能力．