Question

如圖是培育表達人乳鐵蛋白的乳腺生物反應器的技術路線．圖中tet^R表示四環素抗性基因，amp^R表示氨芐青霉素抗性基因，BamH I、Hind III、Sma I直線所示為三種限制酶的酶切位點．據圖回答：

（1）構建基因表達載體時，可用一種或多種限制酶進行切割．為了避免目的基因和載體在酶切后產生的末端發生任意連接，圖中將人乳鐵蛋白基因插入載體應選用

 

限制酶同時酶切載體和人乳鐵蛋白基因．篩選含有重組載體的大腸桿菌首先需要在含

 

的培養基上進行．（2）能使人乳鐵蛋白基因在乳腺細胞中特異性表達的調控序列是

 

（填字母代號）．
A．啟動子     B．tet^R     C．復制原點    D．amp^R
（3）過程①可采用的操作方法是

 

（填字母代號）．
A．農桿菌轉化    B．大腸桿菌轉化    C．顯微注射    D．細胞融合
（4）對早期胚胎進行切割，經過程②可獲得多個新個體．這利用了細胞的

 

性．
（5）為檢測人乳鐵蛋白是否成功表達，可采用

 

（填字母代號）技術．
A．核酸分子雜交     B．基因序列分析     C．抗原-抗體雜交     D．PCR．

Answer 1

考點：基因工程的原理及技術,胚胎移植

專題：

分析：結合題意分析圖解：圖中質粒包括四環素抗性基因、氨芐青霉素抗性基因、啟動子、復制原點，以及兩個限制酶切點，并且兩個限制酶切點的位置均在四環素抗性基因上；目的基因上有三個限制酶切點，與質粒對照，共有的是BamH I、Hind III．
圖中①表示目的基因導入受體細胞，②表示通過胚胎移植的方式將早期胚胎移植到代孕母牛體內．

解答： 解：（1）由圖中信息可知，載體上有HindⅢ和BamHⅠ酶切位點，目的基因上也有它們的酶切位點，應用此2種酶切．當人乳鐵蛋白基因和質粒連接成重組質粒后，tet^R基因被人乳鐵蛋白基因隔開，不是完整的，而amp^R基因是完整的，所以篩選含有重組載體的大腸桿菌首先需要含氨芐青霉素的培養基上進行．
（2）能讓目的基因開始表達的是啟動子，啟動子是RNA聚合酶特異性識別和結合的DNA序列，是基因的一個組成部分，控制基因表達（轉錄）的起始時間和表達的程度．
（3）將目的基因導入到動物中常用顯微注射法．
（4）對早期胚胎進行切割，經過程胚胎移植過程可獲得多個新個體都發育成了個體，這體現了細胞全能性．
（5）一般檢測目的基因是否表達里用抗原-抗體雜交的方法．
故答案為：
（1）BamHI和HindIII    含氨芐青霉素
（2）A 
（3）C
（4）全能性
（5）C

點評：本題難度適中，屬于考綱中識記、理解層次的要求，著重考查了基因工程的限制酶的作用特點、啟動子的功能、目的基因導入動物細胞的方法等相關知識，要求考生具有一定的識圖能力，并能識記相關基礎知識．