Question

16．根據所學知識回答問題：
（1）基因工程中基因表達載體除包括目的基因外，還必須有啟動子、終止子及標記基因等．
（2）若要將某目的基因通過農桿菌轉化法導入植物細胞，先要將目的基因插入農桿菌Ti質粒的T-DNA中，然后用該農桿菌感染植物細胞，通過DNA重組將目的基因插入植物細胞的染色體DNA中．植物組織培養的主要原理是植物細胞具有全能性，具體過程是在無菌和人工控制條件下，將離體的植物器官、組織、細胞培養在人工配制的培養基上，給予適宜的條件，誘導其經過脫分化產生愈傷組織，最終形成完整的植株．
（3）在哺乳動物的核移植實驗中，通過一定的措施將受體細胞激活，使其進行細胞分裂和發育，當胚胎發育到桑椹胚或囊胚階段時，將胚胎移入受體（代孕）動物體內．
（4）生態工程是實現循環經濟最重要的手段之一，請寫出它遵循的基本原理（至少答兩項）物質循環再生原理、物種多樣性原理．

Answer 1

分析 基因工程技術的基本步驟：
（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成．
（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等．
（3）將目的基因導入受體細胞：根據受體細胞不同，導入的方法也不一樣．將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態細胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：（1）基因表達載體包括標記基因、啟動子、終止子、目的基因、復制原點等．
（2）農桿菌中的Ti質粒上的T-DNA可轉移至受體細胞，并且整合到受體細胞染色體的DNA上．根據農桿菌的這一特點，如果將目的基因插入到Ti質粒的T-DNA上，通過農桿菌的轉化作用，就可以把目的基因整合到植物細胞中染色體的DNA上．植物組織培養的主要原理是植物細胞具有全能性，具體過程是在無菌和人工控制條件下，將離體的植物器官、組織、細胞培養在人工配制的培養基上，給予適宜的條件，誘導其經過脫分化產生愈傷組織、叢芽，最終形成完整的植株．
（3）胚胎移植的最佳時期是桑椹胚或囊胚階段．
（4）生態工程遵循的基本原理包括：物質循環再生原理、物種多樣性原理、協調與平衡原理、整體性原理、系統學和工程學原理．
故答案為：
（1）啟動子、終止子
（2）T-DNA    染色體DNA      全能性      無菌      脫分化
（3）桑椹胚或囊胚
（4）物質循環再生原理、物種多樣性原理、（協調與平衡原理、整體性原理、系統學與工程學原理）

點評 本題考查基因工程、細胞工程、胚胎工程和生態工程的相關知識，要求考生識記基因工程的操作步驟及各操作步驟中的相關細節；識記植物組織培育的原理及過程；識記胚胎移植的基本程序；識記生態工程的原理，能結合所學的知識準確答題．