Question

圖1表示含有目的基因D的DNA片段長(zhǎng)度（bp即堿基對(duì)）和部分堿基序列，圖2表示一種質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)和部分堿基序列。現(xiàn)有Msp Ⅰ、BamH Ⅰ、Mbo Ⅰ、Sma Ⅰ4種限制性核酸內(nèi)切酶切割的堿基序列和酶切位點(diǎn)分別為C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

（1）圖1的一條脫氧核苷酸鏈中相鄰兩個(gè)堿基之間依次由         連接。

（2）若用限制酶Sma Ⅰ完全切割圖1中DNA片段，其產(chǎn)物長(zhǎng)度為               。

（3）若圖1中虛線方框內(nèi)的堿基對(duì)被T－A堿基對(duì)替換，那么基因D就突變?yōu)榛�因d。從雜合子分離出圖1及其對(duì)應(yīng)的DNA片段，用限制酶Sma Ⅰ完全切割，產(chǎn)物中共有      種不同DNA片段。

（4）若將圖2中質(zhì)粒和目的基因D通過(guò)同種限制酶處理后進(jìn)行，形成重組質(zhì)粒，那么應(yīng)選用的限制酶是              。在導(dǎo)入重組質(zhì)粒后，為了篩選出含重組質(zhì)粒的大腸桿菌，一般需要用添加             的培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。經(jīng)檢測(cè)，部分含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌菌株中目的基因D不能正確表達(dá)，其最可能的原因是                                          。

 

Answer 1

【答案】

（每空1分，共6分）

（1）脫氧核糖、磷酸、脫氧核糖　　（2）537bp、790bp、661bp（3）4　　

（4）BamH I  抗生素B　　同種限制酶切割形成的末端相同，部分目的基因D與質(zhì)粒反向連接

【解析】

試題分析：（1）一條鏈中的兩個(gè)堿基是依次由脫氧核糖、磷酸、脫氧核糖連接。

（2）由題意可知在DNA片段中有2個(gè)該酶酶切位點(diǎn)，切割后會(huì)產(chǎn)生537bp、790bp、661bp三個(gè)片段。

（3）雜合子是Dd,D被酶切為3段，d中只有一個(gè)酶切位點(diǎn)，切成2個(gè)片段，有一個(gè)是與D相同的661片段，故共4種。

（4）酶切時(shí)應(yīng)將目的基因片段完全切下來(lái)，而在質(zhì)粒上只能切開(kāi)一個(gè)缺口，根據(jù)題干中信息用BamH I最好，由圖2可知該質(zhì)粒含抗生素B抗性基因故培養(yǎng)基中需添加抗生素B。目的基因不能正確表達(dá)的原因可能是同種限制酶切割形成的末端相同，部分目的基因D與質(zhì)粒反向連接。

考點(diǎn)：本題考查基因工程相關(guān)知識(shí)，意在考察考生對(duì)知識(shí)點(diǎn)的理解和信息提取分析能力。