Question

（13分）圖1表示含有目的基因D的DNA片段長度（bp即堿基對）和部分堿基序列，圖2表示一種質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)和部分堿基序列。現(xiàn)有Msp Ⅰ、BamH Ⅰ、Mbo Ⅰ、Sma Ⅰ4種限制性核酸內(nèi)切酶切割的堿基序列和酶切位點分別為C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG。請回答下列問題：

（1）圖1的一條脫氧核苷酸鏈中相鄰兩個堿基之間依次由＿＿＿＿＿＿連接。

（2）若用限制酶SmaⅠ完全切割圖1中DNA片段，產(chǎn)生的末端是＿＿＿＿＿＿＿末端，其產(chǎn)物中有＿＿＿＿＿種不同的DNA片段。

（3）若圖1中虛線方框內(nèi)的堿基對被T－A堿基對替換，那么基因D就突變?yōu)榛�因d。從雜合子分離出圖1及其對應(yīng)的DNA片段，用限制酶Sma Ⅰ完全切割，產(chǎn)物中共有＿＿＿＿＿種不同DNA片段。

（4）若將圖2中質(zhì)粒和目的基因D通過同種限制酶處理后進行，形成重組質(zhì)粒，那么應(yīng)選用的限制酶是＿＿＿＿＿＿＿＿＿。在導(dǎo)入重組質(zhì)粒后，為了篩選出含重組質(zhì)粒的大腸桿菌，一般需要用添加＿＿＿＿＿的培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。

（5）假設(shè)D基因是抗棉鈴蟲的Bt毒蛋白基因，將D基因轉(zhuǎn)入棉花培養(yǎng)成轉(zhuǎn)基因抗蟲棉，如果__________________和_____________________，即可分別在分子水平和個體水平上說明抗蟲基因已成功表達。

 

Answer 1

【答案】

（1）脫氧核糖、磷酸、脫氧核糖　 　（2）平　　3   （3）4　 　（4）BamH I 抗生素B　　

（5）在棉花細胞內(nèi)檢測到Bt毒蛋白   棉花表現(xiàn)出抗棉鈴蟲的性狀（棉鈴蟲吃了轉(zhuǎn)基因棉的枝葉會中毒而死）

【解析】

試題分析：有DNA的結(jié)構(gòu)可知一條脫氧核苷酸鏈中相鄰兩個堿基之間依次由脫氧核糖、磷酸、脫氧核糖連接，由圖知限制酶SmaⅠ切割產(chǎn)生的末端是平末端，其產(chǎn)物為537bp,790bp,661bp三種。基因D切割產(chǎn)物為537bp,790bp,661bp三種，基因d堿基對被替換后，替換部位無法被限制酶SmaⅠ切割，故產(chǎn)生661bp和1327bp兩種片段，綜上所述，為4種片段。由圖可知形成重組質(zhì)粒應(yīng)選用的限制酶是BamH I，抗生素A基因已被破壞，所以培養(yǎng)基中應(yīng)加抗生素B。將D基因轉(zhuǎn)入棉花培養(yǎng)成轉(zhuǎn)基因抗蟲棉，如果在棉花細胞內(nèi)檢測到Bt毒蛋白和棉花表現(xiàn)出抗棉鈴蟲的性狀（棉鈴蟲吃了轉(zhuǎn)基因棉的枝葉會中毒而死）即可分別在分子水平和個體水平上說明抗蟲基因已成功表達。

考點：基因工程

點評：本題考察了學(xué)生的理解能力和識圖能力，難度較大，對于限制酶位點變化前后切割的不同，分析不到位是本題失分的主要原因。