Question

苦馬豆素（SW）最早是從植物灰苦馬豆中分離獲得，SW是否具有抑制腫瘤細胞生長的作用？許多學者做了大量研究，請根據以下實驗研究流程及研究結構回答問題．
取小鼠肝癌Hepal-6細胞
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制成單細胞懸液，接種于多孔板，加入等量培養液，每組設5個平行孔
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于37℃、5% CO₂培養箱中分別培養24h后靜置去除上清液
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加入等量不同濃度SW溶液，于37℃、5% CO₂培養箱中分別培養
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分別在24h、48h、72h時吸取培養液，觀察結果，得到不同濃度SW對細胞存活率影響曲線（如下圖），

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將培養48h的培養液離心，細胞染色，在熒光顯微鏡下觀察拍照，記錄正常細胞和凋亡細胞數目，并采用免疫熒光細胞技術檢測細胞凋亡蛋白Bax和Bcl-2表達量狀況，匯總統計結果（表1）

SW	癌細胞數目	凋亡細胞數目	Bax蛋白	Bcl-2蛋白
2微克/mL	+	++++	++++	+
1微克/mL	++	+++	+++	++
0.5微克/mL	+++	++	++	+++
0微克/mL	++++	+	+	++++

表1  培養48h細胞數目及凋亡蛋白Bax和Bcl-2的表達量情況
注：“+”的數量表示相對值的大小
（1）實驗中首先將小鼠肝癌Hepal-6細胞制成單細胞懸液，于37℃、5%CO₂培養箱中培養的目的是

 

．
（2）處于間期的肝癌Hepal-6細胞分子水平的主要變化是

 

．
（3）實驗中對照組的處理方法應為

 

，利用多孔板培養時，每組設置5個平行孔同時進行培養，計數后統計平均值是為了

 

．
（4）分析圖1中曲線可知，SW對肝癌Hepal-6細胞作用效果的特點是①

 

，②

 

．
（5）表1結果說明SW可以誘發細胞

 

，從分子水平上分析，SW可以導致癌細胞內

 

的合成量增加，寫出與此相關的遺傳信息傳遞的具體過程

 

．

Answer 1

考點：動物細胞與組織培養過程,細胞有絲分裂不同時期的特點,遺傳信息的轉錄和翻譯

專題：

分析：分析表格：隨著SW濃度的增加，癌變的細胞減少，凋亡的細胞增多，可以得出SW可以誘導細胞凋亡；同時，可以看出Bax蛋白隨著SW濃度增加而增加，Bcl-2蛋白著SW濃度增加而減少．
分析曲線圖：SW濃度越高，對細胞生長（存活）的抑制作用越強；SW作用時間越長，對細胞生長（存活）的抑制作用越強．

解答： 解：（1）動物細胞培養，制成單個細胞，防止接觸抑制，給予適宜的環境，使細胞克�。�細胞分裂、細胞增殖），為科研提供足夠的材料．
（2）肝癌Hepal-6細胞具有無限增殖，增殖方式是有絲分裂，在分裂間期細胞中發生了DNA復制和有關蛋白質的合成．
（3）空白對照，不加SW，多組測量為減小誤差使實驗結果更可信．
（4）相同作用時間，不同SW濃度對小鼠肝癌Hepal-6細胞有抑制，且隨著SW濃度增加，抑制作用增強；同一SW濃度，不同作用時間對對小鼠肝癌Hepal-6細胞有抑制，且隨著SW作用時間增加，抑制作用增強．
（5）分析曲線圖可知：SW濃度越高，對細胞生長（存活）的抑制作用越強；SW作用時間越長，對細胞生長（存活）的抑制作用越強．Bax基因表達的過程可以表示為Bax基因轉錄形成mRNA，mRNA翻譯成Bax蛋白，如圖：．
故答案為：
（1）細胞增殖（細胞分裂、細胞克隆）
（2）DNA復制和有關蛋白質的合成
（3）不加SW藥物處理，加等量培養液（或只加等量培養液）  減小誤差使實驗結果更可信
（4）①SW濃度越高，對細胞生長（存活）的抑制作用越強
②（SW）作用時間越長，對細胞生長（存活）的抑制作用越強 

點評：本題結合圖表，考查動物的細胞培養與體細胞克隆，意在考查考生具有對一些生物學問題進行初步探究的能力，具備驗證簡單生物學事實的能力，并能對實驗現象和結果進行解釋、分析和處理．