Question

8．為了獲得純度高的大腸桿菌，需要對大腸桿菌進行培養和分離．培養大腸桿菌一般用牛肉膏-蛋白胨-瓊脂培養基．
（1）稱量時，由于牛肉膏比較黏稠，可以用玻璃棒挑取，放在稱量紙上稱量．由于牛肉膏和蛋白胨容易吸潮，稱量時動作要迅速，稱后要及時蓋上瓶蓋．
（2）在牛肉膏-蛋白胨-瓊脂培養基上的大腸桿菌能生長，說明培養基含有碳源、氮源、無機鹽、水等大腸桿菌生長所需的營養要素．
（3）微生物純化培養可以通過多種接種方法如平板劃線法和稀釋涂布平板法等，使大腸桿菌在固體培養基上形成單個菌落，從而獲得純菌株．

Answer 1

分析 1、制備牛肉膏蛋白胨固體培養基：
（1）計算：依據是培養基配方的比例．
（2）稱量：牛肉膏比較黏稠，可同稱量紙一塊稱取．牛肉膏和蛋白胨易吸潮，稱取時動作要迅速，稱后及時蓋上瓶蓋．
（3）溶化：牛肉膏和稱量紙+水加熱取出稱量紙→加蛋白胨和氯化鈉→加瓊脂（注意：要不斷用玻璃棒攪拌，防止瓊脂糊底而導致燒杯破裂）→補加蒸餾水至100mL．
（4）調pH．
（5）滅菌：對培養基用高壓蒸汽滅菌法，對培養皿等用干熱滅菌法．
（6）倒平板．
2、純化大腸桿菌：
（1）原理：在培養基上將細菌稀釋或分散成單個細胞，使其長成單個的菌落，這個單個菌落就是一個純化的細菌菌落．
（2）微生物常見的接種的方法
①平板劃線法：將已經熔化的培養基倒入培養皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養．在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數逐漸減少，最后可能形成單個菌落．
②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經過大量稀釋后，均勻涂布在培養皿表面，經培養后可形成單個菌落．

解答 解：（1）稱量時，由于牛肉膏比較黏稠，可以用玻璃棒挑取，放在稱量紙上稱量．由于牛肉膏和蛋白胨容易吸潮，稱量時動作要迅速，稱后要及時蓋上瓶蓋．
（2）培養微生物的培養基都必須含有碳源、氮源、無機鹽、水等營養要素．
（3）接種微生物常用平板劃線法和稀釋涂布平板法；采用這兩種方法純化大腸桿菌時，可使大腸桿菌在固體培養基上形成單個菌落，從而獲得純菌株．
故答案為：
（1）玻璃棒　稱量紙　容易吸潮
（2）碳源、氮源、無機鹽、水
（3）平板劃線法　稀釋涂布平板法　菌落

點評 本題考查微生物的分離和培養，要求考生識記培養基的成分、種類及功能；識記接種微生物常用的兩種方法，能結合所學的知識準確答題，屬于考綱識記層次的考查．