Question

【題目】基因工程中需使用特定的限制酶切割目的基因和質(zhì)粒，便于重組和篩選。已知限制酶Ⅰ的識別序列和切點是一G↓GATCC—,限制酶Ⅱ的識別序列和切點是一↓GATC—。根據(jù)圖示判斷下列操作正確的是

A. 目的基因和質(zhì)粒均用限制酶Ⅱ切割

B. 目的基因和質(zhì)粒均用限制酶Ⅰ切割

C. 質(zhì)粒用限制酶Ⅱ切割，目的基因用限制酶Ⅰ切割

D. 質(zhì)粒用限制酶Ⅰ切割，目的基因用限制酶Ⅱ切割

Answer 1

【答案】D

【解析】試題分析：限制酶I的識別序列和切點是-G↓GATCC-，限制酶II的識別序列和切點是-↓GATC-，可知限制酶II能夠識別和切割限制酶I切割后的黏性末端．據(jù)題圖可知，目的基因兩端分別是限制酶I的識別序列和切點是-G↓GATCC-和限制酶II的識別序列和切點是-↓GATC-，只有用限制酶II才能將目的基因切割下來．質(zhì)粒有GeneI和GeneⅡ表示兩種標記基因，分別有限制酶II的識別序列和限制酶I的識別序列；如果用限制酶II切割，則GeneI 和GeneⅡ都被破壞，造成重組質(zhì)粒無標記基因；用限制酶I切割，則破壞GeneⅡ，保留GeneI，其黏性末端和切割目的基因所在DNA的黏性末端相同，可以連接形成重組DNA。