Question

【題目】通過對枯草芽孢桿菌液體發酵所產生的蛋白酶活力的研究，從來源不同的10株枯草芽孢桿菌樣品中篩選出1株蛋白酶活力相對較優的菌株。請回答下列問題：

（1）篩選枯草芽孢桿菌時，用無菌水將樣品制成溶液并進行梯度稀釋，要進行梯度稀釋的理由是__________。

（2）篩選高蛋白酶活力的菌株所用的培養基中應包括 ___、葡萄糖、蛋白質等營養物質，生長因子以及___等；該固體培養基中因含有高濃度蛋白質而不透明，挑選蛋白酶活力相對較優的菌株的依據是 _________________ 。

（3）若要在-20℃條件下長期保存篩選出的優良枯草芽孢桿菌，則菌液中常需要加入一定量的____（填“蒸餾水”“甘油”或“蛋白質”）。

（4）蛋白酶的活力可用_________ 來表示。

（5）利用枯草芽孢桿菌進行液體發酵時，常用搖床進行振蕩培養，據此推測枯草芽孢桿菌的細胞呼吸類型是 ___________________ 。

Answer 1

【答案】樣品制成的溶液中該菌的濃度高，直接培養很難分離得到單個菌落 水、無機鹽 瓊脂 菌落周圍的透明圈較大 甘油 一定條件下，蛋白酶催化蛋白質分解反應的速率 需氧型（或有氧呼吸）

【解析】

1．培養基的成分：碳源、氮源、水、無機鹽、生長因子等。

2．菌種保存

	臨時保存法	甘油管藏法
適用對象	頻繁使用的菌種	長期保存的菌種
培養及類型	固體斜面培養基	液體培養基
溫度	4℃	-20℃
方法	菌落長成后于冰箱中保存，每3～6個月將菌種從舊的培養基轉移到新鮮培養基上	將培養的菌液與等體積滅菌后的甘油混合均勻后于冷凍箱內保存
缺點	菌種易被污染或產生變異	\\

（1）樣品制成的溶液中該菌的濃度高，直接培養很難分離得到單個菌落，因此需要進行梯度稀釋。

（2）微生物的選擇培養基常用固體培養基，因此需要加人凝固劑——瓊脂，培養基中的營養成分應包括水、無機鹽、碳源、氮源等，固體培養基中因含有高濃度蛋白質而不透明，挑選蛋白酶活力相對較優的菌株的依據課通過菌落周圍的透明圈較大為依據篩選。

（3）長期保藏菌種常用甘油管藏法，即向培養液中加入一定量的甘油，然后再將混合液放到20℃的冷凍箱中。

（4）酶活力常用一定條件下，蛋白酶催化蛋白質分解反應的速率來表示。

（5）進行液體發酵時用搖床進行振蕩培養，有利于混勻使微生物充分利用營養物質，并利于增氧，據此推測枯草芽孢桿菌的細胞呼吸類型是需氧型。