Question

6．如圖表示利用胚胎干細胞（簡稱ES細胞）所作的一系列研究，請據圖分析回答：

（1）過程Ⅰ中褐毛基因轉圖胚胎干細胞前需要構建重組DNA（或重組載體），需要的工具酶是限制酶、DNA連接酶；
（2）過程Ⅰ表示胚胎干細胞的體外培養，在培養液中需要加入水、無機鹽、葡萄糖、氨基酸以及天然成分動物血清
等物質，通過培養將獲得遺傳物質穩定的正常細胞群，稱之為細胞株（細胞株/細胞系）．
（3）過程Ⅱ表示將帶有遺傳標記的ES細胞注入早期胚胎的囊胚腔，通過組織化學染色，用于研究動物體器官形成的時間、發育過程以及影響的因素，這項研究利用了胚胎干細胞具有發育的全能性的特點．在哺乳動物胚胎發育過程中，囊胚將進一步發育成原腸胚．
（4）克隆轉基因小鼠常用的技術手段有核移植、細胞培養和胚胎移植．

Answer 1

分析 分析題圖：過程I采用基因工程技術將褐毛基因轉入胚胎干細胞；過程II表示胚胎干細胞的體外培養；過程III中，將帶有遺傳標記的ES細胞注入早期胚胎的囊胚腔，通過組織化學染色，用于研究動物體器官形成的時間、發育過程以及影響的因素．

解答 解：（1）過程Ⅰ中的褐毛基因轉入胚胎干細胞前需構建基因表達載體．構建基因表達載體時，需限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和運載體，還需DNA連接酶將目的基因和運載體連接形成重組DNA分子．
（2）動物細胞培養的培養液中，除了要加入水、無機鹽、葡萄糖、氨基酸等營養物質外，通常還需加入動物血清等天然成分．通過培養將獲得遺傳物質穩定的細胞群體，該細胞群體稱為細胞株．
（3）ES細胞能培養成小鼠個體，說明胚胎干細胞具有發育的全能性．在哺乳動物胚胎發育過程為：受精卵→卵裂期→桑椹胚→囊胚期→原腸胚→個體，可見，囊胚將進一步發育成原腸胚．
（4）從體細胞培養成克隆轉基因小鼠，需采用核移植技術，并進一步通過細胞培養、胚胎移植來實現．
故答案：
（1）重組DNA（或重組載體） 限制酶、DNA連接酶
（2）動物血清  細胞株
（3）發育的全能性   原腸胚
（4）核移植     胚胎移植

點評 本題結合流程圖，考查基因工程、細胞工程和胚胎工程的相關知識，意在考查考生的識圖能力和識記能力，難度不大．