Question

毛角蛋白Ⅱ型中間絲（KlFⅡ）基因與絨山羊的羊絨質量密切相關．獲得轉KIFⅡ基因的高絨質絨山羊的簡單流程如圖．

（1）過程①構建的重組表達載體除具有KlFⅡ基因外，還必須有啟動子、終止子以及標記基因等．其中標記基因的作用是

 

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（2）在過程②中，用

 

處理能將皮膚組織塊分散成單個成纖維細胞．在培養過程中，需將成纖維細胞置于pH值約為

 

培養液中，并且放在含95%的空氣加5%CO₂的混合氣體的培養箱中進行培養．
（3）在過程③中，卵母細胞除可從活體輸卵管中采集外．還可以從已宰殺的母羊

 

中獲取；成熟卵（母）細胞在核移植前需要進行去核處理，同時用微型吸管吸走

 

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Answer 1

考點：基因工程的原理及技術,胚胎移植

專題：

分析：基因表達載體的組成：目的基因+啟動子+終止子+標記基因，其中標記基因是用來鑒別受體細胞是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細胞篩選出來的．
卵母細胞的采集和培養：
主要方法是：用促性腺激素處理，使其超數排卵，然后，從輸卵管中沖取卵子，直接與獲能的精子體外受精．
第二種方法：從已屠宰母畜的卵巢中采集卵母細胞；
第三種方法：是直接從活體動物的卵巢中吸取卵母細胞，叫活體采卵．采集的卵母細胞，都要在體外經人工培養成熟后，才能與獲能的精子受精．

解答： 解：（1）重組表達載體應包括：目的基因、啟動子、終止子以及標記基因等，其中標記基因是用來鑒別受體細胞是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細胞篩選出來的．
（2）動物細胞培養過程可用胰蛋自酶或膠原蛋自酶處理，培養條件為PH大約 7.2-7.4、5%的CO₂的混合空氣．
（3）卵母細胞可從活體輸卵管、已宰殺的母羊卵巢中采集；成熟卵（母）細胞在核移植前需要進行去核處理的同時用微型吸管吸走第一極體，防止干擾．
故答案為：
（1）鑒別受體細胞是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細胞篩選出來
（2）胰蛋白酶或膠原蛋白酶  7.2-7.4
（3）卵巢   第一極體

點評：本題考查了基因工程、細胞工程和胚胎工程的相關知識，要求考生能夠識記基因表達載體的組成以及各結構的功能；識記卵母細胞采集的方法；明確動物細胞培養過程中胰蛋白酶或膠原蛋白酶的使用．