Question

18．酵母菌的維生素、蛋白質含量高，可作食用、藥用等，是提取核苷酸、三磷酸腺苷等多種生化產品的原料，還可用于生產維生素、氨基酸等．科學家將大麥細胞中的使啤酒產生豐富泡沫的LTPl基因植入啤酒酵母菌中，使其產生LTPl蛋白，釀出泡沫豐富的啤酒，具體的操作過程如下：

請據圖回答問題：
（1）LTPl基因與B在體外拼接時除了需要使用限制酶，還需要的工具是DNA連接酶．C中除了LTPl基因和標記基因外，還應包含啟動子、終止子、復制原點等．
（2）有C導入的酵母菌分別在含有青霉素和四環素的兩種選擇（從用途上分類）培養基上的生長情況是在含有青霉素的培養基上能存活，但在含有四環素的培養基上不能存活．
（3）在酒精發酵時罐內溫度一般應控制為18-25℃，如何檢測LTPl基因在啤酒酵母菌中是否表達？看啤酒泡沫豐富程度，檢驗轉基因啤酒酵母菌能否產生LTPl蛋白．

Answer 1

分析 根據題意和圖示分析可知：圖示表示將使啤酒產生豐富泡沫的LTP1基因植入啤酒酵母菌中，使其產生LTP1蛋白，釀出泡沫豐富的啤酒的過程．圖中A為獲取目的基因的過程；B為質粒；C為基因表達載體．
果酒發酵的微生物是酵母菌，條件是18-25℃．

解答 解：（1）圖中C為目的基因和運載體（質粒）連接形成的重組DNA（重組質粒）；構建基因表達載體時，首先需用同一種限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和運載體，其次需用DNA連接酶將目的基因和運載體連接形成重組DNA分子．C中除了LTPl基因和標記基因外，還應包含啟動子、終止子、復制原點等．
（2）由于目的基因插入了質粒中的抗四環素基因中間，所以重組質粒中的抗四環素基因不能表達．將有C導入的酵母菌分別在含有青霉素和四環素的兩種選擇培養基上培養，則生長情況是在含有青霉素的培養基上能存活，但在含有四環素的培養基上不能存活．
（3）在酒精發酵時罐內溫度一般應控制為18-25℃．通過看啤酒泡沫豐富程度，檢驗轉基因啤酒酵母菌能否產生LTPl蛋白等方法來檢測LTPl基因在啤酒酵母菌中是否表達．
故答案為：
（1）DNA連接酶   啟動子、終止子、復制原點
（2）選擇  
（3）18-25℃看啤酒泡沫豐富程度，檢驗轉基因啤酒酵母菌能否產生LTPl蛋白

點評 本題結合轉基因啤酒酵母的培育過程圖，考查基因工程的原理及技術，要求考生識記基因工程的原理、工具及操作步驟，能準確判斷圖中各過程及各物質的名稱，屬于中檔題．