Question

基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和質粒，便于重組和篩選．已知限制酶I的識別序列和切點是一G↓GATCC-，限制酶Ⅱ的識別序列和切點是-↓GATC-．根據圖示判斷下列操作正確的是（　　）

• A、目的基因和質粒均用限制酶Ⅱ切割
• B、目的基因和質粒均用限制酶Ⅰ切割
• C、質粒用限制酶Ⅱ切割，目的基因用限制酶Ⅰ切割
• D、質粒用限制酶Ⅰ切割，目的基因用限制酶Ⅱ切割

Answer 1

考點：基因工程的原理及技術

專題：

分析：由于限制酶Ⅱ能識別限制酶Ⅰ的識別序列，限制酶Ⅰ不能識別限制酶Ⅱ的識別序列．要將目的基因從該DNA鏈中提取出來，需要在目的基因左右切開，所以要用限制酶Ⅱ；質粒不能用限制酶Ⅱ，如果用該酶的話，質粒就會有兩個切口．

解答： 解：限制酶I的識別序列和切點是-G^↓GATCC-，限制酶II的識別序列和切點是-^↓GATC-，可知限制酶II能夠識別和切割限制酶I切割后的黏性末端．據題圖可知，目的基因兩端分別是限制酶I的識別序列和切點是-G^↓GATCC-和限制酶II的識別序列和切點是-^↓GATC-，只有用限制酶II才能將目的基因切割下來．質粒有GeneI和GeneⅡ表示兩種標記基因，分別有限制酶II的識別序列和限制酶I的識別序列；如果用限制酶II切割，則GeneI 和GeneⅡ都被破壞，造成重組質粒無標記基因；用限制酶I切割，則破壞GeneⅡ，保留GeneI，其黏性末端和切割目的基因所在DNA的黏性末端相同，可以連接形成重組DNA．
故選：D．

點評：本題考查基因工程限制酶相關知識，意在考查考生的識圖和理解能力，解題的關鍵是理解基因表達載體構建的過程．