Question

12．尿素是一種高濃度氮肥用長期施用沒有不良影響，但尿素只有通過土壤中某些細菌分解為氨后，才能被植物吸收利用．分解尿素的細菌都能合成脲酶，脲酶能催化尿素水解．某同學要分離土壤中能分解尿素的細菌，并統計每克土壤樣品中活菌數目，培養基配方如下：

KH2pO4	Na2HP04	MgS04•7H20	蛋白胨	葡萄糖	尿素	瓊脂
1.4g	2.1g	0.2g	l．Og	10．Og	l．Og	15．Og

（1）根鋸培養基的成分判斷，該同學能否分離出土壤中分解尿素的細菌不能 （能/不能），原因是培養基含蛋白胨，尿素不是唯一氮源．不能選擇出只分解以尿素為氮源的微生物．
（2）要統計每克土壤樣品中活菌數目，宜采用稀釋涂布平板法接種，根據土壤樣品的稀釋倍數和接種稀釋液的體積，統計平板上的菌落數目就能大約推測出樣品中活菌數．
（3）接種前要對培養基進行滅菌．在整個微生物的分離和培養中，一定要注意在無菌條件下進行．
（4）一同學在純化土壤中的細菌時，發現培養基上的菌落連成一片，最可能的原因是菌液濃度過離，應當怎樣操作才可避免此種現象？對菌液進行梯度稀釋（加大稀釋倍數）．
（5）從胡蘿卜中提取胡夢卜素常用的方法是萃取法．對胡蘿卜進行粉碎、干燥時，要特別注意干燥的溫度和時間，以防止胡籮卜焦糊．提取過程中宜采用水浴方式加熱，以保障安全．
（6）進行植物組織培養時，通常選用莖尖（芽類、根尖）分生組織進行培養可以獲得不含病毒的脫毒苗．長出的叢芽需及時轉移到誘導生根培養基上進行生根培養，與誘導叢芽培養基相比，誘導生根培養基中應增加生長素（激素）含量．

Answer 1

分析 1、尿素分解菌體內的脲酶能夠將土壤中的尿素分解為氨才能被植物吸收利用，尿素分解菌屬于細菌，篩選尿素分解菌需要使用以尿素為唯一碳源的選擇培養基．微生物篩選與培養的關鍵是無菌操作，常用的接種方法是稀釋涂布平板法和平板劃線法．
2、植物有效成分的提取方法主要有蒸餾法、壓榨法和萃取法．

解答 解：（1）據表分析，表中的蛋白胨可以為微生物的生存提供氮源，所以不能分離尿素分解菌；篩選纖維素分解菌需要以纖維素為唯一的碳源的選擇培養基．
（2）固體培養基上的接種方法有稀釋涂布平板法和平板劃線法，稀釋涂布平板法適用于微生物的統計計數，根據土壤樣品的稀釋倍數和接種稀釋液的體積，統計平板上的菌落數目能夠推測樣品中的活菌數．
（3）培養基常用高壓蒸汽滅菌法滅菌，微生物篩選與分離成功的關鍵是無菌操作．
（4）培養基上的菌落連成一片，最可能的原因是菌液沒有梯度稀釋，濃度過高．要避免此種現象需要對菌液進行梯度稀釋．
（5）胡蘿卜素易溶于有機溶劑，從胡蘿卜中提取胡蘿卜素常用的方法是萃取法．對胡蘿卜進行粉碎、干燥時，要特別注意干燥的溫度和時間，以防止胡蘿卜焦糊．有機溶劑都易于燃燒，所以提取過程中宜采用水浴方式加熱，以保障安全．
（6）植物組織培養時選用莖尖或芽尖作為外植體的原因是莖尖或芽尖分生組織是無毒或少毒的，進行培養后可以獲得不含病毒的脫毒苗．植物激素如生長素和細胞分裂素在植物生長發育過程中起很重要作用，生長素含量較高時，可以誘導根的分化，細胞分裂素含量較高時可以誘導芽的分化．因此，長出的叢芽需及時轉移到誘導生根培養基上進行生根培養，與誘導叢芽培養基相比，誘導生根培養基中應增加生長素含量．
故答案為：
（1）不能    培養基含蛋白胨，尿素不是唯一氮源
（2）稀釋涂布平板    菌落數目
（3）滅菌無菌
（4）菌液濃度過離 對菌液進行梯度稀釋（加大稀釋倍數）
（5）萃取法溫度  水浴
（6）莖尖（芽類、根尖）分生組織  生長素

點評 本題主要考查纖維素分解菌的篩選和植物組織培養技術的相關內容，意在考查考生的識記能力和理解所學知識要點，把握知識間內在聯系的能力；能運用所學知識，對生物學問題作出準確的判斷．