Question

1．材料Ⅰ：家蠶細胞具有高效表達外源基因的能力．將人干擾素基因導入家蠶細胞并大規(guī)模培養(yǎng)，可提取干擾素用于制藥．材料Ⅱ：毛角蛋白Ⅱ型中間絲（KIFⅡ）基因與絨山羊的羊絨質量密切相關．獲得轉KIFⅡ基因的高絨質絨山羊的簡單流程如圖．

請依材料所給出的信息分析回答下列問題：
（1）在基因工程操作程序中，基因表達載體的構建是基因工程的核心，為使干擾素基因在家蠶細胞中高效表達，需要把來自cDNA文庫的干擾素基因片段正確插入表達載體的啟動子和終止子之間．
（2）采用PCR技術可驗證干擾素基因是否已經導入家蠶細胞．該PCR反應體系的主要成分應包含：擴增緩沖液（含Mg²⁺）、水、4種脫氧核糖核苷酸、模板DNA、干擾素基因特異的DNA引物對和熱穩(wěn)定DNA聚合酶．
（3）據材料Ⅱ，在過程②中，將成纖維細胞置于5%CO₂的氣體環(huán)境中，CO₂的作用是維持培養(yǎng)液的pH．在過程③中，用促性腺激素處理以獲取更多的卵（母）細胞．成熟卵（母）細胞在核移植前需要進行去核處理．
（4）從重組細胞到早期胚胎過程中所用的胚胎工程技術是早期胚胎培養(yǎng)．在胚胎移植前，通過胚胎分割技術可獲得較多胚胎．

Answer 1

分析 根據題意和圖示分析可知：圖示表示獲得轉KIFⅡ基因的高絨質絨山羊的簡單流程圖，其中①表示基因表達載體的構建過程，該過程需要限制酶和DNA連接酶；②表示動物細胞培養(yǎng)過程，該過程需要采用胰蛋白酶處理組織塊以獲得單個細胞；③表示卵母細胞的采集和培養(yǎng)過程．
基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲取；②基因表達載體的構建；③將目的基因導入受體細胞；④目的基因的檢測與鑒定．其中基因表達載體的構建是基因工程的核心步驟，該載體是由目的基因、標記基因、啟動子和終止子組成的．

解答 解：（1）在基因工程操作程序中，基因表達載體的構建是基因工程的核心．基因表達載體的組成包括：目的基因、標記基因、啟動子、終止子．來自cDNA文庫的干擾素基因片段是通過逆轉錄得到的，無啟動子和終止子等，將其插入在表達載體的啟動子和終止子之間才能構成完整的基因并在受體細胞內表達．
（2）PCR反應體系的主要成分應包含：擴增緩沖液（含Mg²⁺）、水、4種脫氧核糖核苷酸、模板DNA、干擾素基因特異的DNA引物對和熱穩(wěn)定DNA聚合酶．
（3）在動物細胞培養(yǎng)過程中，將成纖維細胞置于5%CO₂的氣體環(huán)境中，CO₂的作用是維持培養(yǎng)液的pH．在卵母細胞的采集和培養(yǎng)過程中，用促性腺激素處理以獲取更多的卵母細胞，成熟卵母細胞在核移植前需要進行去核處理．
（4）從重組細胞到早期胚胎過程中所用的胚胎工程技術是早期胚胎培養(yǎng)．在胚胎移植前，通過胚胎分割技術可獲得較多胚胎．
故答案為：
（1）基因表達載體的構建   啟動子  終止子
（2）干擾素基因特異的DNA引物對     熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）
（3）維持培養(yǎng)液的pH   促性腺激素   去核
（4）早期胚胎培養(yǎng)   胚胎分割

點評 本題結合轉基因山羊培育過程圖，考查基因工程、細胞工程和胚胎工程的相關知識，要求考生識記所列知識要點，能準確判斷圖中各過程的名稱，并能在較簡單的情境中使用，屬于考綱識記層次的考查．