Question

1．下表是基因工程中幾種限制酶識別序列及其切割位點．圖是轉基因香蕉的培育過程，含目的基因的外源DNA和質粒上的箭頭表示相關限制酶的酶切位點．

限制酶	BamH	Hind	EcoR	Sma
識別序列及切割位點	↓ GGATCC CCTAGG ↑	↓ AAGCTT TTCGAA ↑	↓ GAATTC CTTAAG ↑	↓ CCCGGG GGGCCC ↑

（1）從轉基因香蕉培育圖中反映了質粒作為運載體的特點是有多個酶切位點、有標記基因、能在宿主細胞內復制并穩定保存，基因工程中還可以用噬菌體或動植物病毒作為運載體．
（2）圖中的質粒和目的基因構建重組質粒，不能使用SmaI酶切割，原因是SmaI酶會破壞目的基因和質粒．
（3）圖是用BamHⅠ和HindⅢ（限制）酶進行切割得到的目的基因．可以防止含目的基因的外源DNA片段切割后自身環化．

Answer 1

分析 分析DNA分子片段圖：根據圖1中DNA片段兩側的黏性末端可知，左側是用限制酶BamHI切割形成的，右側是用限制酶HindⅢ切割形成的．
分析流程圖：①表示基因表達載體的構建過程；②表示將重組質粒導入農桿菌；③表示采用農桿菌轉化法將目的基因導入香蕉組織細胞；④表示脫分化過程；⑤表示再分化過程．

解答 解：（1）質粒作為運載體必須具備的條件：①要具有限制酶的切割位點； ②要有標記基因（如抗性基因），以便于重組后重組子的篩選③能在宿主細胞中穩定存在并復制；④是安全的，對受體細胞無害，而且要易從供體細胞分離出來．基因工程中還可以用病毒（噬菌體或動植物病毒）作為運載體．
（3）SmaI酶會破壞目的基因和質粒的標記基因（抗性基因），因此圖中構建重組質粒時不能使用SmaI酶切割．
（3）根據圖中DNA片段兩側的黏性末端可知，左側是用限制酶BamHI切割形成的，右側是用限制酶HindⅢ切割形成的，這樣可以防止含目的基因的外源DNA片段切割后自身環化．
故答案為：
（1）有多個酶切位點、有標記基因、能在宿主細胞內復制并穩定保存           噬菌體或動植物病毒
（2）SmaI酶會破壞目的基因和質粒
（3）BamHⅠ和HindⅢ

點評 本題結合圖表，考查基因工程和細胞工程的相關知識，要求考生識記基因工程的操作工具、操作步驟及相關細節；識記植物組織培養的過程及條件，能正確分析題圖，再結合所學的知識準確答題．