Question

1975年Kohler和Milstein的單克隆抗體技術在生產和使用抗體方面開創了新紀元，如圖示單克隆抗體制備流程階段示意簡圖．請據圖回答下列問題：
（1）該技術是在動物細胞培養技術和

 

技術的基礎上發展起來的．
（2）圖10中細胞A體外培養不具有分裂能力，但能分泌

 

，細胞B體外培養能夠

 

．
（3）動物細胞融合常用的方法是

 

．
（4）細胞融合是隨機的過程，在HAT培養基中培養，要篩選出

 

細胞．在細胞培養過程
中，為了促進細胞攝取葡萄糖，常向培養液中加入

 

（激素）．
（5）培養2周后，即測定培養細胞的特征，篩選出

 

的細胞置于不同孔內（如圖所示）培養．此操作前要將培養細胞稀釋到7～10個細胞/ml，每孔滴入0.1ml細胞稀釋液，其目的是

 

．
（6）要獲得大量的單克隆抗體，可對獲得的雜交瘤細胞進行

 

培養．

Answer 1

考點：單克隆抗體的制備過程

專題：

分析：單克隆抗體的制備過程中利用了動物細胞融合技術和動物細胞培養技術，在制備的過程中的兩次篩選考生必須識記．由于細胞融合的結果可能有三種情況：B淋巴細胞自身融合細胞、骨髓瘤細胞自身融合細胞、雜交瘤細胞，因此需要特定的選擇培養基進行篩選．

解答： 解：（1）單克隆抗體的制備技術首先要利用動物細胞融合將B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合，然后要利用動物細胞培養技術對融合的細胞進行篩選，篩選出雜交瘤細胞，再進行培養．
（2）圖中細胞A為經過免疫的B淋巴細胞，該細胞不具有分裂能力，但能分泌特異性抗體．細胞B為骨髓瘤細胞，該細胞能夠無限增殖．
（3）動物細胞融合常用的方法有物理法（離心、震動、電刺激）、化學法（PEG）、生物法（滅活的病毒）．
（4）HAT培養基是選擇培養基．由于細胞融合的結果可能有三種情況：B淋巴細胞自身融合細胞、骨髓瘤細胞自身融合細胞、雜交瘤細胞，因此需要用HAT培養基篩選出雜交瘤細胞．胰島素具有促進組織細胞加速攝取利用葡萄糖的作用，因此在細胞培養過程中，常向培養液中加入胰島素．
（5）培養2周后，篩選出能產生特異性抗體的骨髓瘤細胞細胞置于不同孔內培養．此操作前要將培養細胞稀釋到7～10個細胞/ml，每孔滴入0.1ml細胞稀釋液，其目的是 保證每個孔內不多于一個細胞，達到單一細胞培養以保證抗體的純度的目的．
（6）要獲得大量的單克隆抗體，可對獲得的雜交瘤細胞注射到小鼠的腹腔中進行體內培養，也可利用動物細胞培養技術進行體外培養．
故答案為：
（1）動物細胞融合            
（2）分泌特異性抗體    無限增殖
（3）PEG（滅活的病毒、電刺激）     
（4）雜交瘤      胰島素
（5）特異性分泌抗X蛋白抗體的     保證每個孔內不多于一個細胞，達到單克隆培養的目的（單一細胞培養以保證抗體的純度）
（6）體外或體內（體外和體內、體外、體內）

點評：本題考查了單克隆抗體的制備過程和動物細胞培養等相關知識，意在考查考生理解所學知識的要點，把握知識間的內在聯系的能力．