Question

利用基因工程生產胰島素的過程如下圖，據圖回答：
（1）獲取胰島素基因，應選擇從

 

文庫中獲取．
（2）將重組質粒導入大腸桿菌中，一般用

 

處理大腸桿菌使其處于感受態．
（3）對含有目的基因的大腸桿菌篩選，應制備選擇培養基，除營養成分外還應加入

 

，對培養基應采用

 

滅菌．
（4）轉基因大腸桿菌是否產生了胰島素原，應采用

 

方法檢測．大腸桿菌能否產生有活性的胰島素？

 

，原因是

 

．

Answer 1

考點：基因工程的應用,細胞器之間的協調配合

專題：

分析：分析題圖：圖示表示利用基因工程生產胰島素的過程，①表示基因表達載體的構建過程，該過程需要限制酶和DNA連接酶；②表示將目的基因導入受體細胞的過程；③表示目的基因在受體細胞中表達；④表示蛋白質的加工過程．

解答： 解：（1）獲取真核生物的目的基因一般選擇從cDNA文庫中獲取．
（2）將目的基因導入微生物細胞時，需要用Ca²⁺（或CaCl₂）處理微生物細胞，使之處于易于吸收周圍環境中DNA分子的感受態．
（3）質粒上含有青霉素抗性基因，所以可以用含有青霉素的選擇培養基篩選含有目的基因的大腸桿菌；對培養基應采用高壓蒸汽滅菌．
（4）檢測目的基因是否翻譯形成相應的蛋白質，應采用抗體-抗原雜交方法檢測．大腸桿菌是原核生物，沒有內質網和高爾基體，不能對胰島素原進行加工，因此不能產生具有活性的胰島素．
故答案為：
（1）cDNA     
（2）Ca²⁺ 或CaCl₂     
（3）青霉素   高壓蒸汽
（4）抗體抗原雜交（或抗體抗原特異結合）   否    大腸桿菌無內質網和高爾基體

點評：本題結合利用基因工程生產胰島素的過程圖，考查基因工程、細胞結構和功能、微生物的培養和分離等相關知識，重點考查基因工程的內容，要求考生識記基因工程的操作步驟，準確判斷圖中各字母代表的含有；識記培養基的滅菌方法和原核生物細胞結構特點，明確大腸桿菌是原核生物，不能對蛋白質進行加工．