Question

20．有機農(nóng)藥苯磺隆是一種除草劑，長期使用會污染環(huán)境．研究發(fā)現(xiàn)，苯磺隆能被土壤中某些微生物分解．分離降解苯磺隆的菌株和探索其降解機制的實驗過程如圖甲、乙所示．

（1）微生物生長繁殖所需的主要營養(yǎng)物質(zhì)有碳源、水、無機鹽和氮源四類，該實驗所用的選擇培養(yǎng)基只能以苯磺隆作為唯一碳源，其原因是只有能降解利用苯磺隆的菌株才能生存繁殖成菌落．
（2）與微生物培養(yǎng)基相比，植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基常需添加生長素和細胞分裂素，這些植物激素一般需要事先單獨配制成母液保存?zhèn)溆茫?br />（3）純化菌株時，通常使用的劃線工具是接種環(huán)（或接種針）．劃線的某個平板培養(yǎng)后，第一劃線區(qū)域的劃線上都不間斷地長滿了菌，第二劃線區(qū)域所劃的第一條線上無菌落，其它劃線上有菌落．造成劃線無菌落可能的操作失誤有接種環(huán)在二區(qū)劃線前未冷卻；劃線未從第一區(qū)域末端開始．
（4）為探究苯磺隆的降解機制，將該菌種的培養(yǎng)液過濾離心，取上清液作圖乙所示實驗．該實驗的假設(shè)是
目的菌株能分泌降解苯磺隆的蛋白質(zhì)，該實驗設(shè)計是否合理？為什么？不合理，缺少空白對照．

Answer 1

分析 根據(jù)題意和圖示分析可知：圖示是探索苯磺隆降解機制的實驗過程，圖甲中，首先用選擇培養(yǎng)基從土壤中篩選出菌種，再采用平板劃線法純化出相應(yīng)的菌種；圖乙中：通過測定苯磺隆的濃度測定其降解率．據(jù)此答題．

解答 解：（1）微生物的各種培養(yǎng)基配方一般都含有水、碳源、氮源和無機鹽四類營養(yǎng)；選擇培養(yǎng)基只允許特定種類的微生物生長，又要抑制或阻止其他種類微生物生長，因而必須以苯磺隆為唯一碳源只讓目的菌株生存繁殖．
（2）植物組培過程中啟動細胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵激素是生長素和細胞分裂素；為了避免每次配制時都要稱量，可將激素類先配成母液．
（3）純化菌株時，通常使用的劃線工具是接種環(huán)（或接種針）；接種環(huán)在平板內(nèi)的每一次劃線前，都要先灼燒滅菌冷卻后劃線，而且要從上一次劃線末端而非空白處劃線，不冷卻會燙死上次劃線末端菌株，從空白處劃線是不會有菌株的．
（4）從圖乙上清液中加入蛋白酶溶液可知是用于水解上清液中的某蛋白質(zhì)的，由此可判定實驗假設(shè)是目的菌株通過分泌某種蛋白質(zhì)來降解苯磺隆，但是尚需設(shè)置不加入蛋白酶的對照組實驗，否則沒有說服力，因而不合理．
（5）獲得的菌株若想長期保存，方法是甘油管藏法．
故答案為：
（1）無機鹽和氮源   只有能降解利用苯磺隆的菌株才能生存繁殖成菌落
（2）細胞分裂素    母液
（3）接種環(huán)（或接種針）   接種環(huán)在二區(qū)劃線前未冷卻；劃線未從第一區(qū)域末端開始
（4）目的菌株能分泌降解苯磺隆的蛋白質(zhì)   不合理，缺少空白對照

點評 本題結(jié)合探究實驗過程，考查微生物的培養(yǎng)和分離、探究實驗等知識，要求考生識記培養(yǎng)基的成分、種類及作用；掌握分離微生物常用的兩種方法及操作過程；掌握探究實驗的原則，能結(jié)合圖中信息知識答題．