Question

回答有關生物工程的問題：
（1）構建基因工程表達載體時，用不同類型的限制酶切割DNA后，可能產生

 

，也可能產生平末端．若要用限制酶切割

 

和質粒后使其直接進行連接，則應選擇相同的限制酶．
（2）利用大腸桿菌生產人胰島素時，構建的表達載體含有人胰島素基因及其啟動子等，其中啟動子也是一段

 

分子．在用表達載體轉化大腸桿菌時，常用CaCl2處理大腸桿菌，以利于表達載體進入，這種細胞稱為

 

；為了檢測胰島素基因是否轉錄出了mRNA，可用標記的

 

片段作探針與mRNA雜交，該雜交技術稱為分子雜交技術．為了檢測胰島素基因轉錄的mRNA是否翻譯成胰島素，常用

 

．
（3）如果將目的基因導入動物體內，首先要進行

 

的采集和培養，讓其與

 

的精子在體外受精．

Answer 1

考點：基因工程的應用

專題：

分析：限制酶主要從原核生物中分離純化出來，能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂．形成黏性末端和平末端兩種．
將目的基因導入受體細胞的方法因細胞種類不同而不同，將目的基因導入微生物細胞時，常用CaCl₂處理微生物，使其成為易于吸收周圍環境中DNA分子的感受態細胞．
分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術．

解答： 解：（1）用不同類型的限制酶切割DNA后，可能產生兩種類型的末端，即黏性末端或平末端．若要用限制酶切割目的基因和質粒后使其直接進行連接，則應選擇相同的限制酶，以切割產生相同的黏性末端．
（2）構建的表達載體含有目的基因（人胰島素基因）、標記基因、啟動子及終止子等，其中啟動子、終止了也是一段DNA分子．將目的基因導入受體細胞時，若受體細胞是微生物細胞（如大腸桿菌），常用CaCl₂處理微生物，使其成為易于吸收周圍環境中DNA分子的感受態細胞，這樣有利于表達載體進入受體細胞；為了檢測胰島素基因是否轉錄出了mRNA，可用采用分子雜交技術，即用標記的胰島素基因片段作探針與mRNA雜交．為了檢測胰島素基因轉錄的mRNA是否翻譯成胰島素，常用抗原-抗體雜交技術．
（3）體外受精包括：精子獲能、卵母細胞的采集和培養和體外受精．
故答案：（1）黏性末端    目的基因
（2）DNA     感受態細胞  胰島素基因  抗原-抗體雜交技術
（3）卵母細胞      獲能

點評：本題考查基因工程、胚胎工程的相關知識，意在考查考生的識記能力和理解所學知識要點，把握知識間內在聯系的能力；能運用所學知識，對生物學問題作出準確的判斷．