Question

15．下表為培養某種微生物的培養基配方，請回答有關間題：

KH2PO4	Na2HPO4	MgSO4•7H2O	葡萄糖	尿素	蒸餾水
1.4g	2.1g	0.2g	10.0g	1.0g	定容至1000mL

（1）該培養基只允許分解尿素的細菌生長，這種培養基稱為選擇培養基．該培養基會抑制其它種類微生物生長，其原因是該培養基以尿素為唯一的氮源．
（2）若要通過統計培養基中菌落數來估計樣品中的細菌數，上述培養基中還需要添加的成分是瓊脂，接種時應采用稀釋涂布平板法，該方法接種培養后的菌落，不可能是下圖中的D（單選）．
（3）從土壤中分離出分解尿素的細菌后，要對其作進一步的鑒定，可在上述培養基中加入酚紅指示劑，培養該菌后，如果指示劑變紅，可初步鑒定該種細菌能夠分解尿素．
（4）某同學用0.1mL稀釋液在稀釋倍數為10⁶的平板中測得菌落數的平均值為163，則每mL樣品中的細菌數是1.63×10⁹．

Answer 1

分析 1、選擇培養基是在培養基中加入相應的特殊營養物質或化學物質，抑制不需要的微生物的生長，有利于所需微生物的生長．
2、稀釋涂布平板法計數時，首先將待測樣品制成均勻的系列稀釋液，盡量使樣品中的微生物細胞分散開，使成單個細胞存在（否則一個菌落就不只是代表一個細胞），再取一定稀釋度、一定量的稀釋液接種到平板中，使其均勻分布于平板中的培養基內．經培養后，由單個細胞生長繁殖形成菌落，統計菌落數目，即可計算出樣品中的含菌數．

解答 解：（1）該培養基以尿素為唯一氮源，只允許分解尿素的細菌生長，故這種培養基稱為選擇培養基．該培養基會抑制其它種類微生物生長，其原因是該培養基以尿素為唯一的氮源，不能利用尿素的細菌不能在該培養基上生長．
（2）若要通過統計培養基中菌落數來估計樣品中的細菌數，需用固體培養基，故上述培養基中還需要添加的成分是瓊脂，接種時應采用稀釋涂布平板法法，該方法接種培養后的菌落，不可能是圖中的D，因D為平板劃線法．
（3）由于細菌分解尿素的過程中產生了氨，氨使培養基的PH值升高，故從土壤中分離出分解尿素的細菌后，要對其作進一步的鑒定，可在上述培養基中加入酚紅指示劑，培養該菌后，如果指示劑變紅，可初步鑒定該種細菌能夠分解尿素．
（4）某同學用0.1mL稀釋液在稀釋倍數為10⁶的平板中測得菌落數的平均值為163，則每mL樣品中的細菌數=平板上菌落數的平均值÷體積×稀釋倍數=163÷0.1×10⁶=1.63×10⁹．
故答案為：
（1）選擇   以尿素為唯一的氮源
（2）瓊脂   稀釋涂布平板法    D （1分）
（3）酚紅   紅
（4）1.63×10⁹

點評 本題考查了微生物培養技術的相關知識，考生要明確選擇培養基的選擇作用，識記培養基為微生物提供的營養成分，識記常用的接種方法和具體操作過程，對于微生物培養技術的掌握及分解尿素的菌的分離和計數的掌握應用是解題的關鍵．