Question

13．加熱會使蛋白質變性，在變性過程中肽鍵是否因此而斷裂呢？請設計一個證明“蛋白質在加熱變性后肽鍵沒有斷裂”的實驗．
材料、用具：0.0lg•mL^-1 的 CuS04溶液、0.1g•mL^-1的NaOH溶液、蛋清、清水、酒精燈、試管、滴管等必備用品．
（1）實驗原理：蛋白質中的肽鍵與雙縮脲試劑發生顏色反應，呈紫色．如果加熱變性的蛋白質與雙縮脲試劑反應仍呈紫色，即可證明肽鍵沒有斷裂．
（2）方法步驟：
①取兩支試管，分別編號A、B，向兩支試管中加入等量的蛋清液．
②對A試管加熱，使蛋清變性，B試管不加熱．
③冷卻后，分別向兩支試管滴加1mL0.1g•mL^-1的NaOH溶液，搖勻，再向兩支試管分別滴入4滴0.01g•mL^-1的CuS0₄溶液，搖勻．
④觀察兩試管的顏色變化．
（3）預期結果：A、B試管均變藍．
（4）實驗結論：蛋白質在加熱變性后肽鍵沒有斷裂．

Answer 1

分析 實驗設計原則是單一變量原則和對照原則．已知該實驗過程是加熱變性情況，所以一組加熱一組不加熱，其他條件都保證相同，蛋白質鑒定過程要注意雙縮脲試劑的使用順序，最后通過顏色反應比較兩個試管的變化并得出結論．

解答 解：（1）實驗原理：蛋白質中的肽鍵與雙縮脲試劑發生顏色反應，呈紫色．如果加熱變性的蛋白質與雙縮脲試劑反應仍呈紫色，即可證明肽鍵沒有斷裂．
（2）根據實驗設計原則的單一變量原則和對照原則，實驗的方法步驟如下：
①取兩支試管，分別編號A、B，向兩支試管中加入等量的蛋清液（對照原則）；
②對A試管加熱，使蛋清變性，B試管不加熱（單一變量原則）；
③冷卻后，分別向兩支試管滴加1 mL 0.1g•mL^-1的NaOH溶液，搖勻，再向兩支試管分別滴入4滴0.01g•mL^-1 的CuS0₄溶液，搖勻． 
④觀察兩試管的顏色變化．
（3）實驗結論是蛋白質在加熱變性后肽鍵沒有斷裂，因此預期結果是A、B試管均變紫．
（4）實驗結論：蛋白質在加熱變性后肽鍵沒有斷裂．
故答案為：
（1）蛋白質中的肽鍵與雙縮脲試劑發生顏色反應，呈紫色．如果加熱變性的蛋白質與雙縮脲試劑反應仍呈紫色，即可證明肽鍵沒有斷裂
（2）等量的蛋清液     對A試管加熱，使蛋清變性，B試管不加熱       分別向兩支試管滴加1 mL 0.1g•mL^-1的NaOH溶液，搖勻，再向兩支試管分別滴入4滴0.01g•mL^-1 的CuS0₄溶液，搖勻
（3）A、B試管均變藍
（4）蛋白質在加熱變性后肽鍵沒有斷裂

點評 本題檢測蛋白質實驗，對于此類試題，需要考生掌握的細節較多，如實驗的原理、實驗步驟等，此外還需要考生掌握探究實驗的原則，并能據此完善實驗步驟．