Question

土壤是“微生物的天然培養基”，下面是有關土壤中分解尿素的細菌分離和計數的實驗過程，請根據圖回答相關問題：

（1）能分解尿素的細菌代謝類型為

 

，應從富含有機質的土壤表層取土樣．
（2）為分離出土壤中分解尿素的細菌，應該用

 

的培養基進行分離，并加入

 

指示劑進行鑒別．
（3）若取土樣5g，應加入

 

ml的無菌水配制成稀釋10倍土壤溶液．因土壤中細菌密度很大，需要不斷加以稀釋，配制成如圖所示的不同濃度的土壤溶液．取樣稀釋前，一定要

 

以減少誤差．將10³-10⁷倍的稀釋液分別吸取0.1mL加入到固體培養基上，用

 

將菌液鋪平．這種接種方法稱為

 

．
（4）將接種的培養皿放置在37℃恒溫培養箱中培養24h～48h，觀察并統計具有

 

（現象）的菌落數，結果如下表，其中

 

倍的稀釋比較合適．

稀釋倍數	103	104	105	106	107
菌落數（個）	500	367	248	36	18

Answer 1

考點：以尿素為氮源，測定能生長的細菌的數量,微生物的分離和培養

專題：

分析：閱讀題干和題圖可知，本題是考查土壤中分解尿素的細菌的分離與計數的知識，根據問題涉及的具體內容梳理相關知識點，然后分析解答．

解答： 解：（1）能分解尿素的細菌將尿素氧化成氨氣，代謝類型為異養需氧型．
（2）尿素為唯一碳源的培養基上，只有能分解尿素的菌才能以尿素作為氮源生長繁殖，不能分解尿素的菌因缺乏氮源無法生長繁殖，因此分離出土壤中分解尿素的細菌，應該用尿素為唯一碳源的培養基進行分離，分解尿素的菌在分解尿素時產生氨氣，使酚紅指示劑顯紅色，所以要加入酚紅指示劑進行鑒別．
（3）若取土樣5g，應加入45ml的無菌水配制成稀釋10倍土壤溶液，樣品的稀釋程度直接影響平板上生長的菌落的數目，選用一定稀釋范圍的樣品進行培養，取樣稀釋前，一定要將菌液搖勻以減少誤差；將10³-10⁷倍的稀釋液分別吸取0.1mL加入到固體培養基上，用稀釋涂布平板法將菌液用涂布器涂布到固體培養基上．
（4）將接種的培養皿放置在37℃恒溫培養箱中培養24h～48h，觀察并統計具有紅色環帶的菌落既是分解尿素的菌的菌落，估算樣品中的活菌數時，往往選取菌落數在30 到300之間的平板，分析表格是數據可知，10⁵和10⁶的稀釋度平板菌落數在這一范圍．
故答案應為：
（1）異養需氧型
（2）尿素為唯一氮源      酚紅
（3）45
（4）搖均（震蕩、混勻）    涂布器（玻璃刮刀）      稀釋涂布（平板）法
（5）紅色環帶       10⁵或10⁶

點評：本題是知識點是分解尿素的菌的代謝類型，分解尿素的菌的分離應該選用的培養基，稀釋涂布平板法的操作過程，統計菌落數的平板要求，主要考查學生對分解尿素的菌的分離和計數的知識的掌握和運用．