Question

生物-選修1：生物技術實踐
金黃色葡萄球菌是一種具有高度耐鹽性的微生物，可引起人類肺炎、腸炎等疾病．金黃色葡萄球菌在血平板（培養基中添加適量血液）上生長時，可破壞菌落周圍的紅細胞，使其褪色．下圖為定性檢測鮮牛奶中是否存在金黃色葡萄球菌的操作流程，請回答相關問題．
（1）按細胞結構分類，金黃色葡萄球菌屬于

 

生物，從培養過程分析，金黃色葡萄球菌可進行

 

呼吸．
（2）7.5%NaCl肉湯培養基可為微生物提供的營養成分包括

 

，用7.5%NaCl肉湯培養基進行選擇培養的主要目的是

 

．
（3）操作中在血平板上的接種方法是

 

，接種操作前后需要對接種工具進行

 

滅菌．
（4）在制備血平板時需將pH調節至

 

 （“微酸性”或“微堿性”）后滅菌，待培養基

 

后，再加入適量血液．按培養基功能分類，血平板屬于

 

培養基．
（5）經多次規范操作、重復實驗，血平板上均出現

 

的菌落，初步證明鮮牛奶中存在金黃色葡萄球菌，但鮮牛奶供應商仍認為此菌并非鮮牛奶所攜帶，因此，要對本操作進行完善，完善的方案是

 

．

Answer 1

考點：微生物的分離和培養

專題：

分析：（1）微生物的營養物質有5類，分別是水、無機鹽、碳源、氮源及生長因子．
（2）培養基按功能分為選擇培養基和鑒別培養基：
①選擇培養基：培養基中加入某種化學物質，以抑制不需要的不需要的微生物的生長，促進所需要的微生物生長，培養、分離出特定的微生物（如培養酵母菌和霉菌，可在培養基中加入青霉素；培養金黃色葡萄球菌，可在培養基中加入高濃度的食鹽）
②鑒別培養基：根據微生物的代謝特點，在培養基中加入某種指示劑或化學藥品，鑒別不同種類的微生物，如可用伊紅-美藍培養基鑒別飲用水或乳制品中是否有大腸桿菌（若有，菌落呈深紫色，并帶有金屬光澤）
（3）接種最常用的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法．接種的目的是使聚集在一起的微生物分散成單個細胞，并在培養基表面形成單個細菌繁殖而成的子細胞群體--菌落．
（4）剛果紅染色法篩選纖維素分解菌的原理：剛果紅是一種染料，它可以與像纖維素這樣的多糖物質形成紅色復合物，但并不和水解后的纖維二糖和葡萄糖發生這種反應．當我們在含有纖維素的培養基中加入剛果紅時，剛果紅能與培養基中的纖維素形成紅色復合物．當纖維素被纖維素酶分解后，剛果紅-纖維素的復合物就無法形成，培養基中會出現以纖維素分解菌為中心的透明圈．這樣，我們就可以通過是否產生透明圈來篩選纖維素分解菌．

解答： 解：（1）如何判斷細菌：帶“菌”字的生物中，“菌”字前有“桿”“球”“弧”“螺旋”等表示形態的字的都是細菌，如大腸桿菌、肺炎雙球菌、葡萄球菌、霍亂弧菌等都是細菌，葡萄球菌屬于細菌，屬于原核生物；在培養的過程中由于沒有密閉培養，所以葡萄球菌屬于有氧呼吸的菌種．
（2）7.5%NaCl肉湯培養基中含有蛋白質，所以可以提供氮源和碳源，又含有水分和氯化鈉，所以提供的營養物質為碳源、氮源、水和無機鹽；高濃度的鹽溶液可以對微生物進行選擇，而葡萄球菌可以生存在高濃度的鹽溶液中．
（3）使用接種環進行接種應該只用平板劃線法；接種工具滅菌的方式是灼燒．
（4）血液是堿性的，所以培養基應該調至堿性；滅菌法方法是高壓蒸汽滅菌法，所以應該等到培養基冷卻后加入血液，否則會破壞血細胞；由于該培養基能夠鑒別是否含有葡萄球菌，所以屬于鑒別培養基．
（5）根據題意，“金黃色葡萄球菌在血平板（培養基中添加適量血液）上生長時，可破壞菌落周圍的紅細胞，使其褪色”，所以如果經多次規范操作、重復實驗，血平板上均出現透明圈的菌落，說明初步證明鮮牛奶中存在金黃色葡萄球菌；但這個實驗要這是對照實驗，對照實驗的設計是在培養基中不加鮮牛奶．
答案：（1）原核     有氧     
（2）碳源、氮源、水和無機鹽    增加金黃色葡萄球菌的數量
（3）平板劃線法      灼燒    
（4）微堿性   冷卻     鑒別
（5）周圍存在透明圈    設置不加鮮牛奶其他操作均相同的對照組

點評：設置對照的主要目的是排除實驗組中非測試因素對實驗結果的影響，提高實驗結果的可信度，對照實驗的設計的重點是單一變量原則，在本題中單一變量的原則的設計是在培養基中是否加入鮮牛奶．