Question

11．回答下列有關微生物的問題．
孔雀石綠（C₂₃H₂₅N₂Cl）常用作紡織業的染料，也可用作水產養殖業的殺菌驅蟲劑．但它具有高毒性、高殘留的危害，因此對孔雀石綠廢水的處理已成為環境科學領域關注的熱點．科研人員從某化工廠污水池中分離獲得了能降解孔雀石綠的細菌菌株A．主要步驟如圖1所示．

（1）①過程稱為稀釋，②過程是為了篩選．
（2）I號培養基中應加入孔雀石綠作為唯一碳源．使用稀釋涂布平板（或平板劃線）法接種可以在II號培養基上獲得單個菌落．接種時的關鍵是“無菌”，確保無菌的方法有在超凈臺中進行接種、接種操作在酒精燈火焰附近進行、接種環（針）在接種前后要過火并燒成紅色（寫出2種）．
實驗中使用的培養基和培養皿需要高壓蒸汽滅菌法進行滅菌，高壓蒸汽滅菌的要求是1.05kg/cm²（103kPa），121⁰C，時間15～30分鐘，因為此條件下可以殺死包括芽孢在內的所有微生物．
（3）研究人員進一步研究了不同金屬離子對菌株A降解孔雀石綠的影響，實驗結果如圖2．從圖2中可以看出多數金屬離子對菌株A降解孔雀石綠有抑制作用，唯有Pb²⁺的作用相反．若要排除Pb²⁺本身對孔雀石綠有降解作用，則應如何設置可作對照的培養基樣本含等量的Pb²⁺但不接種菌株A．

Answer 1

分析 1、微生物培養基一般都含有水、碳源、氮源、無機鹽，此外還要滿足微生物生長對pH、特殊營養物質以及氧氣的要求．對異養微生物來說，含C、N的化合物既是碳源，也是氮源，即有些化合物作為營養要素成分時并不是起單一方面的作用．
2、微生物常見的接種的方法
①平板劃線法：將已經熔化的培養基倒入培養皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養．在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數逐漸減少，最后可能形成單個菌落．
②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經過大量稀釋后，均勻涂布在培養皿表面，經培養后可形成單個菌落．

解答 解：（1）分析實驗可知，圖中①過程稱為稀釋，②過程是為了篩選能降解孔雀石綠的細菌菌株A．
（2）本實驗的實驗目的是從某化工廠污水池中分離獲得了能降解孔雀石綠的細菌菌株A，I號培養基中應加入孔雀石綠作為唯一碳源．使用稀釋涂布平板（或平板劃線）法接種可以在II號培養基上獲得單個菌落．接種時的關鍵是“無菌”，確保無菌的方法有在超凈臺中進行接種、接種操作在酒精燈火焰附近進行、接種環（針）在接種前后要過火并燒成紅色．
實驗中使用的培養基和培養皿需要高壓蒸汽滅菌法進行滅菌，高壓蒸汽滅菌的要求是1.05kg/cm²（103kPa），121⁰C，時間15～30分鐘，因為此條件下可以殺死包括芽孢在內的所有微生物．
（3）由圖分析可知，與不加金屬離子的對照組相比，多數金屬離子對菌株A降解孔雀石綠有抑制作用，唯有Pb²⁺的作用相反．若要排除Pb²⁺本身對孔雀石綠有降解作用，則應設置含等量的Pb²⁺但不接種菌株的培養基樣本作為對照．
故答案為：
（1）稀釋      篩選
（2）孔雀石綠      稀釋涂布平板（或平板劃線）     在超凈臺中進行接種、接種操作在酒精燈火焰附近進行、接種環（針）在接種前后要過火并燒成紅色   1.05kg/cm²（103kPa），121⁰C，時間15～30分鐘
（3）抑制         含等量的Pb²⁺但不接種菌株A

點評 本題主要考查微生物的利用、微生物的分離和培養的相關知識，要求考生能夠識記微生物分離與純化的方法，掌握消毒和滅菌的方法，能夠根據題圖獲得有效解題信息，難度適中．