Question

13． 分離特定微生物及生物大分子為生產生活實踐提供便利，是生物技術發展的優越性之一．  回答下列問題：
  （1）從土壤中分離能分解石油的細菌，應采用選擇（按功能劃分）培養基進行培養，為了獲得單個菌落，可采用的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法，接種過程應在酒精燈火焰旁附近進行，菌落周圍的透明圈越大，說明該菌株降解石油的能力越強．
  （2）實驗室常采用凝膠色譜法分離血紅蛋白，分離前，對血紅蛋白水溶液進行透析的目的是去除相對分子量較小的雜質．圖中能正確表示相對分子質量不同蛋白質在凝膠中行進的過程的是B，相對分子質量大的蛋白質，經過的路程較短（填“較短”或“較長”）．

Answer 1

分析 （1）培養基的營養構成：各種培養基一般都含有水、碳源、氮源和無機鹽．培養基的分類：①按物理性質分，分為液體培養基和固體培養基，固體培養基中含有凝固劑，一般是瓊脂．②按化學成分分，分為天然培養基和合成培養．兩者的區別是天然培養基成分不確定，合成培養基成分的含量是確定的．③按用途分，分為選擇培養基和鑒別培養基．選擇培養基主要是培養、分離特定的微生物，培養酵母菌可在培養基中加入青霉素；鑒別培養基可以鑒定不同的微生物，比如鑒別飲用水中是否含有大腸桿菌，可以用伊紅-美藍培養基，如果菌落呈深紫色，并帶有金屬光澤，說明有大腸桿菌．
（2）常用滅菌方法：灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌法．
培養基、培養皿、接種環、實驗操作者的雙手、空氣、牛奶所采用的滅菌和消毒方法依次：高壓蒸汽滅菌、干熱滅菌、灼燒滅菌、化學消毒、紫外線滅菌、巴氏消毒法．
（3）接種最常用的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法．接種的目的是使聚集在一起的微生物分散成單個細胞，并在培養基表面形成單個細菌繁殖而成的子細胞群體--菌落．
（4）凝膠色譜法分離蛋白質的原理：凝膠色譜法是根據相對分子質量的大小來分離蛋白質的有效方法，相對分子質量小的蛋白質容易進入凝膠內部的通道，路程長，移動的速度慢，相對分子質量大的蛋白質不容易進入凝膠內部的通道，路程短，移動的速度快，因此相對分子質量不同的蛋白質得以分離．

解答 解：（1）欲篩選出能降解石油的菌株，培養基中應只含有原油而無其它碳源，不能降解原油的細菌在此培養基上不能生存，這類培養基屬于選擇培養基．分離純化菌種時，需采用的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法，使聚集在一起的細菌細胞分散成單個細胞，從而能在培養基表面形成單個的菌落，以便純化菌種．無菌操作要求在整個實驗過程中操作都在酒精燈火焰附近進行，以避免周圍微生物的污染．降解原油能力越強的菌株，在菌落周圍形成的分解圈越大．
（2）血紅蛋白溶液的粗分離采用的方法是透析，即將集的血紅蛋白溶液放在透析袋中進行透析，去掉分子量較小的雜質，原理是小分子雜質可以通過透析袋進入緩沖液中，血紅蛋白分子量較大，不能通過透析袋進入緩沖溶液．相對分子質量小的蛋白質容易進入凝膠內部的通道，路程長，移動的速度慢，相對分子質量大的蛋白質不容易進入凝膠內部的通道，路程短，移動的速度快．
故答案為：
（1）選擇    平板劃線法　稀釋涂布平板法   酒精燈火焰旁    強
（2）去除相對分子量較小的雜質  B  較短

點評 本題的知識點是微生物培養過程中的無菌技術，分離微生物的常用的接種方法和血紅蛋白的提取和分離，主要考生能理解所學知識的要點，把握知識間的內在聯系的能力．