Question

【題目】科學家將魚抗凍蛋白基因轉入番茄，使番茄的耐寒能力大大提高。下圖中①～⑦是轉基因抗凍番茄培育過程中的相關步驟，Ⅰ表示相關結構。請據圖作答：

（1）獲取“魚抗凍蛋白基因”有幾條途徑，其中一條途徑是以 為模板，在 的催化下，合成互補的單鏈DNA，然后再合成雙鏈DNA；另一條途徑是從基因文庫中獲取，基因文庫又可分為 文庫和部分基因文庫（如：cDNA文庫）。

（2）轉基因過程中的核心步驟是① ，在此過程中使用的工具酶有 。魚的抗凍蛋白基因必需插入到Ti質粒的 中才能整合到受體細胞的染色體DNA中，得到的結構Ⅰ上除了目的基因、標記基因外，還必須有 。

（3）步驟④～⑦應用了 技術，該技術的理論依據是 。其中⑤和⑥步驟分別叫做

和 。

Answer 1

【答案】（1）mRNA 逆轉錄酶（反轉錄酶） 基因組文庫

（2）基因表達載體的構建 限制性核酸內切酶（限制酶）和DNA連接酶

丁一DNA啟動子、終止子

（3）植物組織培養植物細胞全能性 脫分化再分化

【解析】

試題分析：（1）目的基因的獲得可以采用反轉錄法，以mRNA為模板，通過逆轉錄酶催化合成DNA基因文庫包括基因組文庫和部分基因文庫

（2）基因表達載體的構建是基因工程的核心步驟，需要用限制酶對目的基因和質粒進行切開后用DNA連接酶進行連接。Ti質粒上的T—DNA可以轉移至受體細胞染色體的DNA上，因此目的基因要插入到T一DNA中。基因表達載體的組成除了目的基因、標記基因外，還必須有啟動子和終止子以轉錄目的基因。

（3）步驟④⑦應用了植物組織培養技術，其理論依據是植物細胞全能性。其中④是脫分化形成愈傷組織，⑤為再分化形成幼苗。