Question

12．胡蘿卜營養價值高，被國內外營養專家譽為“小人參”，其中含有豐富的天然胡蘿卜素，不溶于水，易溶于有機溶劑．三七是一種名貴中藥，其有效成分是三七皂苷，是一種非脂質有機物，易溶于水．請問答有關問題：
（1）為了更容易地榨取胡蘿卜汁，提高澄清度，需要加入果膠酶，該酶通常從真菌細胞中提取，篩選真菌細胞時常用的兩種接種方法是平板劃線法、稀釋涂布平板法，從功能看，所用培養基為選擇培養基．
（2）從胡蘿卜中提取胡蘿卜素常用的方法是萃取法．采用該方法時需要加熱，一般使用水浴加熱．而從三七中提取三七皂苷時，提取前應對三七材料用石灰水浸泡，以提高壓榨提取率．
（3）欲大量繁殖高品質胡蘿卜植株和三七植株，應選擇植物組織培養的方法，在配置培養基時，除了瓊脂和基本營養物質之外常常還需要添加植物激素（或生長素和細胞分裂素）
（4）培養時，由于操作失誤，某同學發現培養基上感染了微生物，欲確定其中是否含有纖維素分解菌．把微生物培養在以纖維素為唯一碳源的培養基中，并加入剛果紅染料，培養后培養基中出現透明圈，表明其中含有纖維素分解菌．纖維素分解菌的發酵產物中含有纖維素酶等多種蛋白質，要從多種蛋白質中純化得到纖維素酶的方法是凝膠色譜法．為了使分離純化得到的纖維素酶能夠反復利用，可采用固定化酶技術．該技術常用的方法有化學結合法\物理吸附法（答一種）．

Answer 1

分析 1、微生物的接種方法：
①平板劃線法：通過接種環在瓊脂固體培養基表面連續劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養基表面．
②稀釋涂布平板法：將駿業進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養基的表面，進行培養．
2、選擇性培養基是指根據某種微生物的特殊營養要求或其對某化學、物理因素的抗性而設計的培養基．
3、胡蘿卜素的性質：胡蘿卜素是橘黃色結晶，化學性質比較穩定，不溶于水，微溶于乙醇，易溶于石油醚等有機溶劑．

解答 解：（1）接種微生物常用的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法；篩選真菌細胞時所用培養基為選擇培養基．
（2）從胡蘿卜中提取胡蘿卜素常用萃取法．采用該方法時需要加熱，一般使用水浴加熱．而從三七中提取三七皂苷時，提取前應對三七材料用石灰水浸泡，以提高壓榨提取率．
（3）植物組織培養技術可大量繁殖優良品種；決定植物細胞再分化和脫分化的關鍵因素是植物激素的種類和比例，因此在配置培養基時，除了瓊脂和基本營養物質之外常常還需要添加植物激素（或生長素和細胞分裂素）．
（4）在以纖維素為唯一碳源的培養基中，只有纖維素分解菌才能生存，因此欲確定其中是否含有纖維素分解菌，要把微生物培養在以纖維素為唯一碳源的培養基中，并加入剛果紅染料，培養后培養基中出現透明圈，表明其中含有纖維素分解菌．纖維素分解菌的發酵產物中含有纖維素酶等多種蛋白質，要從多種蛋白質中純化得到纖維素酶的方法是凝膠色譜法．為了使分離純化得到的纖維素酶能夠反復利用，可采用固定化酶技術，固定化方法包括包埋法、化學結合法和物理吸附法，但酶分子較小，容易從包埋材料中漏出來，因此常用化學結合法或物理吸附法固定化酶．
故答案為：
（1）平板劃線法    稀釋涂布平板法選擇
（2）萃取法  水浴   石灰水
（3）植物組織培養   植物激素 （或生長素和細胞分裂素）
（4）纖維素   剛果紅   凝膠色譜法    固定化酶    化學結合法\物理吸附法

點評 本題綜合考查微生物的分離和培養、培養基、制備和應用固定化酶等知識，要求考生識記分離微生物的方法，掌握選擇培養基的作用；識記固定化技術，能結合所學的知識準確答題．