Question

10．生物技術已經滲入到了我們生活的方方面面，比如：
（1）目前臨床用的胰島素生效較慢，科學家將胰島素B鏈的第28和29個氨基酸調換順序，成功獲得了速效胰島素．生產速效胰島素，需要對胰島素基因（胰島素/胰島素mRNA/胰島素基因/胰島）進行定向改造．為了將改造后的分子導入受體大腸桿菌，一般需要用Ca²⁺處理大腸桿菌細胞，使之成為感受態．
（2）科學家利用人絨毛膜促性腺激素的單克隆抗體，制作出了早早孕試紙．要獲得人絨毛膜促性腺激素的單克隆抗體，需要先將人絨毛膜促性腺激素注射到小鼠體內，培養一段時間之后，將從小鼠的脾臟中提取出的B淋巴細胞和小鼠的骨髓瘤細胞進行細胞融合，獲得雜交細胞，雜交細胞經特定培養基培養和抗體檢測等方法篩選后，就能獲得既能持續增殖，又能產生人絨毛膜促性腺激素的單克隆抗體的細胞了．
（3）許多不孕不育的夫婦受益于試管嬰兒技術，在體外受精前，要對采集到的精子進行獲能處理，才能與卵子受精．受精后形成的受精卵要移入發育培養液中繼續培養到4細胞階段再移植到母親體內，早期胚胎發育到囊胚階段的某一時刻，會沖破透明帶，稱之為“孵化”．
（4）科學家在玉米基因組中加入了根瘤菌的基因，用來抑制海藻糖酶的活性，從而獲得了高海藻糖抗旱玉米植株．該培育過程的核心步驟為基因表達載體的構建．將目的基因導入玉米細胞最常用的方法是農桿菌轉化法．用導入目的基因的玉米細胞快速繁殖抗旱植株需要用到植物組織培養技術．

Answer 1

分析 1、基因工程技術的基本步驟：
（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成．
（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等．
（3）將目的基因導入受體細胞：根據受體細胞不同，導入的方法也不一樣．將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態細胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．
2、單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發生免疫反應，之后從小鼠脾臟中獲取已經免疫的B淋巴細胞；誘導B細胞和骨髓瘤細胞融合，利用選擇培養基篩選出雜交瘤細胞；進行抗體檢測，篩選出能產生特定抗體的雜交瘤細胞；進行克隆化培養，即用培養基培養和注入小鼠腹腔中培養；最后從培養液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體．

解答 解：（1）將胰島素B鏈的第28和29個氨基酸調換順序后可獲得速效胰島素．因此，要生產速效胰島素，可采用蛋白質工程技術，這就需要對胰島素基因進行定向改造．將目的基因導入微生物細胞常用感受態細胞法，即用Ca²⁺處理大腸桿菌細胞，使之成為易于吸收周圍環境中DNA分子的感受態．
（2）科學家利用人絨毛膜促性腺激素的單克隆抗體，制作出了早早孕試紙．要獲得人絨毛膜促性腺激素的單克隆抗體，需要先將抗原（人絨毛膜促性腺激素）注射到小鼠體內，培養一段時間之后，將從小鼠的脾臟中提取出的B淋巴細胞和小鼠的骨髓瘤細胞進行細胞融合，獲得雜交細胞，雜交細胞經特定培養基培養和抗體檢測等方法篩選后，就能獲得既能持續增殖，又能產生人絨毛膜促性腺激素的單克隆抗體的細胞了．
（3）體外受精前，要對采集到的精子進行獲能處理，才能與卵子受精．受精后形成的受精卵要移入發育培養液中繼續培養到4細胞階段再移植到母親體內．早期胚胎發育到囊胚階段的某一時刻，會沖破透明帶，稱之為“孵化”．
（4）基因工程的核心步驟為基因表達載體的構建．將目的基因導入植物細胞最常用的方法是農桿菌轉化法．將導入目的基因的玉米細胞培育成植株需要用到植物組織培養技術．
故答案為：
（1）胰島素基因     Ca²⁺      感受態
（2）人絨毛膜促性腺激素      B淋巴細胞      骨髓瘤細胞
（3）獲能     發育培養液     囊胚
（4）基因表達載體的構建    農桿菌轉化法    植物組織培養

點評 本題考查基因工程、植物組織培養和單克隆抗體的制備等知識，要求考生識記基因工程的原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細節；識記植物組織培養技術的過程及應用；識記單克隆抗體的制備過程，能結合所學的知識準確答題．