Question

20．2，4-D作為除草劑在農田中大量使用，研究認為它是某種淋巴癌的致病因子．為降低2，4-D的危害，科研人員通過基因工程技術構建了能高效降解2，4-D的基因工程菌．請回答：
（1）在農業生產上常會使用高濃度2，4-D進行麥田除草，在殺死雜草的同時卻不會對小麥生長造成損害，原因是不同植物對2，4-D敏感程度不同．
（2）從被2，4-D污染的土壤中得到能降解2，4-D的細菌，從該菌提取RNA，構建cDNA（或部分基因）文庫，進一步獲得目的基因．
（3）PCR技術擴增目的基因的過程是：目的基因DNA受熱變性后解鏈為單鏈，引物與單鏈相應互補序列結合，然后在熱穩定DNA聚合（或Taq）酶作用下進行延伸，如此重復循環多次，使目的基因的量呈指數（或2ⁿ）形式擴增．
（4）一個基因表達載體的組成中要有標記基因，標記基因的作用是為了鑒別受體細胞中是否含有目的基因．欲知基因工程成功與否，需要進行分子水平的檢測，有時還需進行個體生物學（或個體）水平的鑒定．

Answer 1

分析 基因工程技術的基本步驟：
（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成．
（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等．
（3）將目的基因導入受體細胞：根據受體細胞不同，導入的方法也不一樣．將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態細胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：（1）2，4-D是生長素類似物，其作用具有兩重性，即低濃度促進生長，高濃度抑制生長．利用不同植物對2，4-D敏感程度不同（雙子葉植物比單子葉植物對生長素更敏感），可用高濃度2，4-D進行麥田除草．
（2）從工程菌中提取RNA構建的基因文庫是部分基因文庫（cDNA文庫）．
（3）PCR技術擴增目的基因的過程是：目的基因DNA受熱變性后解鏈為單鏈，引物與單鏈相應互補序列結合，然后在熱穩定性DNA聚合酶（Taq酶）作用下進行延伸，如此重復循環多次，使目的基因的量呈指數（2ⁿ）增長．
（4）標記基因的作用是為了鑒別受體細胞中是否含有目的基因．欲知基因工程成功與否，需要進行分子水平檢測，有時還需進行個體生物學水平鑒定．
故答案為：
（1）高      不同植物對2，4-D敏感程度不同
（2）cDNA（或部分基因）
（3）熱穩定DNA聚合（或Taq）   指數（或2ⁿ）
（4）是否含有目的基因  分子  個體生物學（或個體）

點評 本題考查基因工程的相關知識，要求考生識記基因工程的原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細節問題；掌握生長素的作用特點及生長素類似物在生產實踐中的應用，能結合所學的知識準確答題．