Question

5．某實驗小組從土壤中分離獲得了產生淀粉酶的芽孢桿菌，但因其對淀粉的轉化效率低，嘗試對其進行改造，以獲得對淀粉轉效率高的菌株．
回答下列問題：
（1）為獲得對淀粉轉化率高的菌株進行了如下實驗：
第一步：配制以淀粉為唯一碳源的固體培養基，并進行高壓蒸汽滅菌處理，檢測制作的培養基是否無菌的方法是將空培養基置于無菌其他條件適宜的條件下培養，觀察是否有菌落產生．
第二步：將含有分解淀粉的芽孢桿菌的菌液適當稀釋后，涂布在平板上，隨即用適當劑量的紫外線照射，其目的是誘導產生基因突變．
第三步：將用紫外線照后的菌株放入恒溫箱中培養，菌落形成后，加入碘液，觀察菌落周圍培養基顏色變化和變化范圍的大小，周圍出現透明圈現象的菌落即為初選擇菌落．
第四步：經分離、純化后可獲得對淀粉轉化率高的菌株．
（2）如圖是對淀粉轉效率高的菌株純化培養過程中，劃線接種培養的結果．圖在②（填圖中編號）區域出現了單個菌落，產生單個菌落的最初細菌數目是1個細菌．據圖分析，在培養基上劃線接種時，劃線的順序依次是①③②（用編號表示）．
（3）實驗后，所用過的培養基需要統一進行高壓蒸氣滅菌法滅菌后再丟棄．

Answer 1

分析 從土壤中分離目的微生物的一般步驟是：土壤取樣、選擇培養、梯度稀釋、涂布培養和篩選菌株．培養基一般采用高壓蒸汽滅菌法滅菌，富集培養可以使用液體培養基．選擇培養基是指通過培養混合的微生物，僅得到或篩選出所需要的微生物，其他不需要的種類在這種培養基上是不能生存的．篩選出能分泌淀粉酶的芽孢桿菌必須使用以淀粉為唯一碳源的選擇培養基．

解答 解：（1）第一步：篩選淀粉分解菌需要配置使用以淀粉為唯一碳源的選擇培養基．檢測制作的培養基是否無菌的方法是將空培養基置于無菌其他條件適宜的條件下培養，觀察是否有菌落產生，若有菌落產生，則培養基被污染，否則沒有被污染．
第二步：實驗中用適當劑量的紫外線照射的目的是誘導產生基因突變．
第三步：淀粉與碘液呈藍色，淀粉分解菌會分解淀粉使得菌落周圍出現透明圈，所以周圍出現透明圈的菌落就是初選擇菌落．
（2）據圖分析，圖中的②區域出現了單個菌落，產生單個菌落的最初細菌數目是1個細菌細胞．根據各區域菌落的生長多少判斷圖中在培養基上劃線接種時，劃線的順序依次是①③②．
（3）為防止使用過的培養基污染環境，所用過的培養基需要統一進行高壓蒸氣滅菌法滅菌后再丟棄．
故答案為：
（1）淀粉 將空培養基置于無菌其他條件適宜的條件下培養，觀察是否有菌落產生    誘導產生基因突變   透明圈
（2）②1  ①③②
（3）高壓蒸氣滅菌法滅菌

點評 本題主要考查微生物的篩選與分離，意在強化學生對微生物培養的相關知識的識記、理解與運用．