Question

8．目的基因與載體結合所需的條件是（　�。�
①限制酶   ②具有標記基因的質粒   ③DNA聚合酶   ④目的基因   ⑤DNA連接酶   ⑥四種脫氧核苷酸．

• A． ①②③④⑤
• B． ②④⑤⑥
• C． ②③④⑥
• D． ①②④⑤

Answer 1

分析 作為運載體必須具備的條件：①要具有限制酶的切割位點； ②要有標記基因（如抗性基因），以便于重組后重組子的篩選③能在宿主細胞中穩定存在并復制；④是安全的，對受體細胞無害，而且要易從供體細胞分離出來．

解答 解：①目的基因與運載體結合時，首先要用同一種限制酶切割目的基因和運載體，以形成相同的黏性末端，①正確； 
②作為運載體的質粒要具有抗性基因作為標記基因，便于篩選，②正確； 
③目的基因與運載體結合需要DNA連接酶，但不需要DNA聚合酶，③錯誤； 
④目的基因與運載體結合當然需要目的基因，④正確；     
⑤切割后的目的基因和質粒結合需要利用DNA連接酶連接成重組質粒，⑤正確；        
⑥四種脫氧核苷酸一般作為DNA復制和逆轉錄過程的原料，目的基因與運載體結合不需要四種脫氧核苷酸，⑥錯誤．
故選：D．

點評 本題比較簡單，考查基因工程的相關知識，要求考生識記基因工程的原理及操作工具，掌握基因工程的操作步驟及各步驟中需要注意的細節問題，能根據題干要求做出準確的判斷．