Question

19．微生物與人類關(guān)系密切．下表為培養(yǎng)某種微生物的培養(yǎng)基配方，請回答有關(guān)問題：

KH2PO4	Na2HPO4	MgSO4•7H2O	硝酸銨	瓊脂
1.4g	2.1g	0.2g	1.0g	15.0g

（1）從此培養(yǎng)基的配方來看，最適合培養(yǎng)的微生物是B．
A．酵母菌           B．硝化細菌          C．纖維素分解菌            D．大腸桿菌
（2）培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基可以分為液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基，兩種培養(yǎng)基的配方中一般都含有水、碳源、氮源和無機鹽，培養(yǎng)基還需要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求．
（3）稀釋涂布平板法是微生物接種常用的方法之一，該法是將菌液進行一系列梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布在瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進行培養(yǎng)．稀釋條件足夠時，可形成由單個細胞形成的單個菌落，因此可用于微生物純化培養(yǎng)．
（4）如果要進行土壤中分解尿素的細菌的分離，培養(yǎng)基中必須含有的成分是尿素，驗證分解尿素的
細菌是否存在，常用的方法是培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，若變紅則說明存在分解尿素的細菌．
（5）微生物接種的方法很多，在用平板劃線法操作結(jié)束時，為什么仍需要灼燒接種環(huán)？殺死接種環(huán)上的細菌，避免對環(huán)境造成污染．
（6）假設培養(yǎng)結(jié)束后，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上菌落連成一片，可能的原因是什么？（列舉兩項）稀釋倍數(shù)不夠，菌液的濃度太高；劃線時，兩次劃線之間沒有灼燒接種環(huán)；培養(yǎng)過程中滅菌不嚴格，受到了其他微生物的污染．

Answer 1

分析 微生物的營養(yǎng)物質(zhì)主要包括體液、氮源、水和二氧化碳等．分離和純化微生物的接種方法主要有稀釋涂布平板法和平板劃線法．尿素分解菌可以用酚紅指示劑進行鑒定．

解答 解：（1）根據(jù)題表分析，該培養(yǎng)基配方中有氮源、無機鹽等，缺少碳源，所以可以作為自養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基．
A、酵母菌屬于異養(yǎng)兼性厭氧型微生物，A錯誤；
B、硝化細菌屬于化能自養(yǎng)型微生物，B正確；
C、纖維素分解菌是異養(yǎng)微生物，C錯誤；
D、大腸桿菌屬于異養(yǎng)微生物，D錯誤．
故選：B．
（2）培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基可以分為液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基．培養(yǎng)基中的營養(yǎng)成分主要包括碳源、氮源、水和無機鹽等，培養(yǎng)基還需要滿足微生物生長對特殊營養(yǎng)物質(zhì)、酸堿度以及氧氣的要求．
（3）稀釋涂布平板法需要將菌液進行一系列梯度稀釋，然后進行涂布平板培養(yǎng)，可形成由單個細胞形成的單個菌落，所以該方法可以用于微生物的純化培養(yǎng)．
（4）如果要進行土壤中分解尿素的細菌的分離，培養(yǎng)基中必須含有的成分是尿素，驗證分解尿素的
細菌是否存在，常用的方法是培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，若變紅則說明存在分解尿素的細菌．
（5）常用的微生物接種的方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法；在用平板劃線法接種時，第一步劃線前，灼燒接種環(huán)是防止接種環(huán)上有其它微生物而污染培養(yǎng)基，以后每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次接種時留下的菌種，使下一次劃線時，接種環(huán)上的菌種直接來自上次劃線的末端，以便通過多次劃線后，得到單個的菌落；劃線結(jié)束后仍要灼燒接種環(huán)，以免菌種對環(huán)境造成污染．
（6）假設培養(yǎng)結(jié)束后，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上菌落連成一片，可能的原因是稀釋倍數(shù)不夠，菌液的濃度太高；劃線時，兩次劃線之間沒有灼燒接種環(huán)；培養(yǎng)過程中滅菌不嚴格，受到了其他微生物的污染．
故答案為：
（1）B
（2）固體培養(yǎng)基　  碳源　  氮源　  pH　  特殊營養(yǎng)物質(zhì)
（3）一系列梯度稀釋  　菌落
（4）尿素　  培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，若變紅則說明存在分解尿素的細菌　（5）殺死接種環(huán)上的細菌，避免對環(huán)境造成污染
（6）稀釋倍數(shù)不夠，菌液的濃度太高；劃線時，兩次劃線之間沒有灼燒接種環(huán)；培養(yǎng)過程中滅菌不嚴格，受到了其他微生物的污染

點評 本題主要考查微生物的營養(yǎng)物質(zhì)及接種和培養(yǎng)，意在強化學生對微生物的培養(yǎng)的相關(guān)知識的識記、理解與運用．