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11．將小鼠骨髓瘤細胞與一種B淋巴細胞融合，可使融合的細胞經培養產生單克隆抗體，下列有關此項技術的說法中不正確的是（　　）

	A．	動物細胞融合和動物細胞培養技術是單克隆抗體技術的基礎
	B．	B淋巴細胞與骨髓瘤細胞直接放入培養液中就能融合為雜交瘤細胞
	C．	實驗中雜交瘤細胞從培養基中吸收葡萄糖的方式是主動運輸
	D．	按照培養基的用途分類，實驗中篩選雜交瘤細胞的培養基是選擇培養基

10．小鼠雜交瘤細胞表達的單克隆抗體用于人體試驗時易引起過敏反應，為了克服這個缺陷，可選擇性擴增抗體的可變區基因（目的基因）后再重組表達．下列相關敘述正確的是（　　）

	A．	設計擴增目的基因的引物時不必考慮表達載體的序列
	B．	用PCR方法擴增目的基因時必須知道基因的全部序列
	C．	PCR體系中一定要添加從受體細胞中提取的DNA聚合酶
	D．	一定要根據目的基因編碼產物的特性選擇合適的受體細胞

9．如圖為單克隆抗體生產過程示意圖，請據圖回答問題：
（1）傳統制備抗體的方法是向動物體內反復注射某種抗原，使B細胞和記憶細胞增殖、分化為漿細胞，漿細胞產生抗體，然后從動物血清中分離所需抗體
（2）與誘導植物原生質體融合不同的是，②過程還可以使用滅活誘導融合．
②過程誘導后，用選擇性培養基篩選出雜交瘤細胞，雜交瘤細胞的特點是即可大量增殖，又能產生特異性抗體．
（3）將經過③過程得到的能分泌專一抗體的雜交瘤細胞注入到小鼠腹腔中，一段時間后從小鼠腹水中就可以提取大量的鼠源性單克隆抗體．
（4）給某患者連續隔周注射某種鼠源性單抗治療一種病毒感染性疾病，開始病毒量明顯減少，一段時間后，病毒量又開始上升，上升的原因可能是病毒發生了變異，也可能是人體產生了能與鼠源性抗體特異性結合的抗體，使鼠源性單抗不能發揮抗病毒的作用．
（5）研究人員可應用蛋白質工程技術，改造鼠源性單抗分子的結構，降低人體對鼠源性單抗的免疫反應．

8．以SARS病毒核衣殼蛋白為抗原，利用細胞工程方法可制備出SARS病毒的單克隆抗體．請根據圖回答以下問題：
（1）首先將特定的抗原注射入小鼠體內，然后從小鼠的脾臟中獲得B淋巴細胞．
（2）將B淋巴細胞與小鼠的骨髓瘤細胞融合成雜交瘤細胞，融合過程中使用的與植物體細胞雜交不同的誘導因素是滅活的病毒．經過誘導后，考慮兩兩融合，能獲得3種雜交細胞，因此還要用特定的選擇性培養基進行篩選，通過多次最終篩選獲得的雜種細胞應具有的特點是既能無限增殖，又能產生所需抗體．
（3）將雜交瘤細胞在體外條件下進行大規模培養，培養基是按照細胞的需求將各種營養物質按一定比例進行配制的，該培養基需加入糖、氨基酸、無機鹽和促生長因子、微量元素及血清血漿等，通入二氧化碳的主要目的是維持pH穩定．
（4）該技術的基礎是動物細胞培養，利用制備的單克隆抗體可準確地診斷出SARS病毒感染者，原理是針對SARS病毒的抗體具有特異性，可以與SARS病毒特異性結合．

7．2009年10月，我國自主研發的轉基因抗蟲水稻“華恢1號”獲得農業部頒發的安全證書．下圖表示該抗蟲水稻主要培育流程，據圖回答：

（1）④過程應用的主要生物技術是植物組織培養；該技術的過程主要包括脫分化和再分化兩個階段，利用的基本原理是植物細胞的全能型．
（2）殺蟲基因（crylA）是人們根據幾種Bt毒蛋白的分子結構，設計并人工合成的蛋白質，這屬于蛋白質工程技術范疇．
（3）組建理想的載體需要對天然的質粒進行改造．如圖是天然土壤農桿菌Ti質粒結構示意圖（示部分基因及部分限制性內切酶作用位點），據圖分析：

①人工改造時，要使抗蟲基因表達，還應插入啟動子．
②人工改造時用限制酶Ⅱ處理，其目的是：第一，去除質粒上的tms和tar（基因），保證T-DNA進入水稻細胞后不會引起細胞的無限分裂和生長；第二，使質粒帶有單一限制酶作用位點，有利于目的基因準確插入．第三，使質粒大小合適，可以提高轉化效率等．
③若用限制酶Ⅰ分別切割改造過的理想質粒和帶有抗蟲基因的DNA分子，并構成重組Ti質粒．分別以含四環素和卡那霉素的培養基培養已成功導入抗蟲基因的水稻胚細胞，觀察到的細胞生長的現象是在含卡那霉素的培養基能夠生長，在含四環素的培養基上不能生長．
（4）若限制酶Ⅱ切割DNA分子后形成的粘性末端為，則該酶識別的核苷酸序列是GACGTC．

6．用動物細胞工程技術獲取單克隆抗體，所采用的技術有（　　）
①細胞培養技術②細胞融合技術③抗體檢測技術④細胞篩選⑤核移植技術⑥免疫學技術．

A．

②③④

B．

①②③④⑥

C．

②③⑤

D．

④⑤⑥

5．生產單克隆抗體時，要在培養基中加入特定的試劑篩選出雜交瘤細胞．下列可作為這種試劑的是（　　）

	A．	能選擇性地抑制骨髓瘤細胞DNA復制的試劑
	B．	能激活B淋巴細胞的原癌基因的試劑
	C．	能阻止雜交瘤細胞核糖體上所有蛋白質合成的試劑
	D．	能抑制B淋巴細胞DNA復制的試劑

4．2009年春末，甲型H1N1流感病毒成為全人類共同的敵人．某生物工程公司擬利用細胞工程方法，以甲型H1N1病毒衣殼蛋白為抗原制備單克隆抗體．相關敘述正確的是（　　）

	A．	將純化的核衣殼蛋白反復注射到小鼠體內，產生的血清抗體為單克隆抗體
	B．	體外培養單個漿細胞還可以獲得大量針對甲型H1N1病毒的淋巴因子
	C．	將等量漿細胞和骨髓瘤細胞混合，經PEG誘導融合后的細胞均為雜交瘤細胞
	D．	利用該單克隆抗體與甲型H1N1病毒衣殼蛋白特異性結合的方法可診斷出病毒感染者

3．埃博拉病毒（EBO）呈纖維狀，EBO衣殼外有包膜，包膜上有5種蛋白棘突（VP系列蛋白和GP蛋白），其中GP蛋白最為關鍵，能被宿主細胞強烈識別．EBO結構及基因組如圖1所示．目前尚無針對該病毒的特效藥或疫苗．

（1）埃博拉病毒（EBO）的遺傳物質是RNA，EBO病毒容易變異的原因是RNA是單鏈結構，穩定性較差．．
（2）科研人員利用經EBO免疫后小鼠的B淋巴（效應B或漿）細胞與鼠的瘤細胞進行雜交，獲得純凈的單一品種抗體，其特點是特異性強、靈敏度高、反應快（產量大），可以用此抗體與藥物制成“生物導彈”，抗擊埃博拉病毒（EBO）．
（3）圖2表示轉基因技術生產埃博拉病毒蛋白疫苗與重組病毒粒子疫苗的基本過程．
①該技術的目的基因最好選擇GP蛋白基因（GP或GP基因）．
②實驗發現，用昆蟲細胞替代酵母菌承擔輔助重組質粒與重組病毒的共轉染，也能收集到目的基因表達的蛋白質，這一現象說明不同生物共用一套遺傳密碼．
③以EBO病毒包膜蛋白作為疫苗比較安全，其原因是蛋白質不具侵染性，不會破壞細胞結構．
④重組病毒中須除去腺病毒復制激活基因（E），目的是使重組病毒不能在人體內大量復制，提高了疫苗的安全性．

2．胰島B細胞移植是一種有效治療糖尿病的方法．利用小鼠再生胰腺提取物（RPE）可定向誘導人羊膜間充質干細胞（hAMSCs）分化成胰島B細胞．請回答下列問題：

（1）取人羊膜組織刮除血塊、上皮細胞，沖洗后剪碎，然后用胰蛋白酶處理，去除細胞表面（糖）蛋白，使細胞分散開，最終制成hAMSCs懸液．將細胞懸液放入培養瓶中進行原代培養，先后出現細胞貼壁生長、接觸抑制現象象，直至細胞停止分裂增殖，這時需要將細胞進行相關處理，然后進行傳代培養．
（2）取傳至第3代的hAMSCs放入細胞培養板，同時加入RPE進行誘導分化培養．該代hAMSCs能保持細胞正常的（二倍體）核型．誘導分化培養15天后，提取細胞的RNA（或mRNA），用胰島素基因探針進行分子雜交，可初步檢測hAMSCs是否分化成胰島B細胞．
（3）用人的雜交瘤細胞來生產人源單克隆抗體難以成功，因此單克隆抗體大都來自鼠源．但鼠源單抗在人體內使用，會產生較強的免疫原性，為解決這一問題，發明了嵌合抗體．大致過程如圖所示，嵌合抗體能降低鼠源抗體的免疫原性，從圖中可以推測，免疫原性的產生主要與抗體的C（選填“V區”、“C區”）有關．構建的人鼠嵌合抗體基因表達載體除了標記基因和目的基因外，還有啟動子、終止子．
（4）科學家們用細胞融合實驗證明，分化的細胞中存在“閑置不用”的結構基因．他們把大鼠肝腫瘤細胞和小鼠成纖維細胞融合成雜交瘤細胞，篩選出含有兩套肝細胞染色體和一套成纖維細胞染色體的細胞．這些細胞既保持了合成大鼠肝細胞3種特異蛋白的能力，也合成了小鼠干細胞的這3種蛋白，但是在正常的小鼠成纖維細胞中從不合成這些．由此可見，融合實驗證明了小鼠成纖維細胞含有不表達的但肝細胞專一表達的基因，在特定條件下這些“閑置基因”也可表達．