Question

7．回答下列有關遺傳信息的傳遞與表達及其免疫的問題．
草魚病毒性出血病是由草魚呼腸弧病毒（GCRV）引起的，草魚患病后死亡率很高，是養殖生產中的主要病害之一．如圖是科學家嘗試用基因工程的方法制備核酸疫苗，并通過草魚攻毒實驗檢測免疫保護效果的過程示意圖．圖中P10和PH為啟動子，箭頭表示轉錄方向．PV7₁和PV7₂為GCRV外殼蛋白基因（DNA片段）．

（1）接種疫苗是預防微生物傳染病的有效方法．給草魚接種疫苗的目的是使草魚產生主動免疫力．下列屬于引起草魚患病毒性出血病的抗原物質的是CD．
A．PV7₁和PV7₂    B．重組質粒    C．GCRV外殼蛋白    D．呼腸弧病毒
（2）GCRV的遺傳物質是雙鏈RNA，因此需要設計一對引物，在逆轉錄酶的作用下，通過PCR技術獲得大量的PV7基因．
（3）在制備重組質粒的過程中，要提高核酸疫苗構建的成功率，下列操作合理的有ADE（多選）．
A．使用不同的限制酶切割PV7₁和PV7₂基因B．使用相同的限制酶切割PV7₁和PV7₂基因
C．將兩個PV7基因同時連接到質粒上D．將兩個PV7基因先后連接到質粒上
E．用兩種限制酶先后兩次切割質粒F．用一種限制酶連續兩次切割質粒
（4）對草莓進行攻毒實驗檢測的過程中，首先是將不同濃度的核酸疫苗注射進入草魚體內，PV7將通過轉錄和翻譯過程產生GCRV外殼蛋白，使草魚體內產生抗體和記憶B細胞．然后還要給各組草魚注射等量的相同濃度的GCRV，觀察統計草魚的免疫保護率．
攻毒實驗檢測的結果見下表：
草魚病毒性出血病核酸疫苗實驗魚的死亡率和免疫保護率記錄表

組別	注射疫苗量	實驗魚數	死亡魚數	死亡率	免疫保護率
1	10ug	20尾	0尾	0%	100%
2	30ug	20尾	0尾	0%	100%
3	60ug	20尾	1尾	5%	95%
4	30ug普通質粒	20尾	6尾	30%	70%
5	0	20尾	20尾	100%	0%

（5）根據表中數據表明核酸疫苗的作用是非常有效的．科學家發現組別4注射導入普通質粒的草魚免疫保護率達到了70%，但是與組別5比較魚體內并未檢測到抗體水平的明顯增加，應用免疫知識分析可能的原因是導入草魚體內的普通質粒能提高草魚的非特異性免疫能力．

Answer 1

分析 分析題圖：圖中P10和PH為啟動子，箭頭表示轉錄方向．PV7₁和PV7₂為GCRV外殼蛋白基因（DNA片段）．
分析表格：組別5是對照組，與對照組相比，注射疫苗量在10ug～60ug時，草魚病毒性出血病核酸疫苗實驗魚的死亡率都幾乎為0，即免疫保護率幾乎均為100%．組別4注射導入普通質粒的草魚免疫保護率達到了70%．

解答 解：（1）給草魚接種疫苗的目的是使草魚產生主動免疫力．草魚病毒性出血病是由草魚呼腸弧病毒（GCRV）引起的，而GCRV的外殼蛋白是引起草魚患病毒性出血病的抗原物質．
（2）GCRV的遺傳物質是雙鏈RNA，因此需要設計一對引物，在逆轉錄酶的作用下，通過PCR技術獲得大量的PV7基因．
（3）由圖可知，啟動子P10能啟動PV7₁基因的轉錄，啟動子PH能啟動PV7₂基因的轉錄，因此為了防止連接的位置有誤，應使用不同的限制酶切割PV7₁和PV7₂基因，也需要不同的限制酶先后兩次切割質粒，再將兩個PV7基因先后連接到質粒上．
（4）基因控制蛋白質的合成包括轉錄和翻譯兩個過程，因此PV7將通過轉錄和翻譯過程產生GCRV外殼蛋白（抗原），受到抗原刺激后，草魚體內產生抗體和記憶B細胞．然后還要給各組草魚注射等量的相同濃度的GCRV，觀察統計草魚的免疫保護率．
（5）組別4注射導入普通質粒的草魚免疫保護率達到了70%，但是與組別5比較魚體內并未檢測到抗體水平的明顯增加，可能的原因是導入草魚體內的普通質粒能提高草魚的非特異性免疫能力．
故答案為：
（1）使草魚產生主動免疫力   CD
（2）逆轉錄  PCR
（3）ADE
（4）轉錄和翻譯     記憶B細胞    等量的相同濃度的GCRV
（5）導入草魚體內的普通質粒能提高草魚的非特異性免疫能力

點評 本題結合圖標，考查基因工程和免疫的相關知識，要求考生識記基因工程的原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細節；識記免疫調節的具體過程，能結合圖中信息準確答題，屬于考綱理解和應用層次的考查．