Question

15．動物基因工程最令人興奮的應用是建立生物反應器來生產重要醫藥產品．抗凝血酶Ⅲ蛋白是一種血漿糖蛋白，臨床上主要用于血液性疾病的治療．下圖為培育轉基因奶牛獲得抗凝血酶Ⅲ蛋白的流程圖．請回答下列問題：

（1）短時間內大量擴增抗凝血酶Ⅲ蛋白基因經常采用PCR技術．過程①是將抗凝血酶Ⅲ蛋白基因導入受精卵，該過程常用的方法是顯微注射法．
（2）過程②包括早期胚胎培養（或“動物細胞培養”） 技術和胚胎移植技術；為獲得多只與該轉基因奶牛遺傳物質相同的牛犢，在過程②還可使用胚胎分割技術．
（3）若要檢測牛奶中是否含有抗凝血酶Ⅲ蛋白，可采用抗原-抗體雜交技術．
（4）如果檢測發現抗凝血酶Ⅲ蛋白基因被成功導入了受精卵，但卻沒有檢測到抗凝血酶Ⅲ蛋白的存在，那應該考慮分別位于目的基因首端的啟動子和末端的終止子沒有設計好，應從這方面進一步改善．

Answer 1

分析 1、與自然條件下的DNA復制相比，PCR擴增技術的不同之處在于：需要引物，需要耐高溫的熱穩定性DNA聚合酶．
2、基因工程的操作步驟中，在導入目的基因之前，需要構建基因表達載體，即將目的基因與奶牛乳腺蛋白基因的啟動子等調控組件重組在一起．
3、目的基因的檢測與鑒定：（1）分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術．（2）個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：（1）利用PCR技術能在體外大量擴增目的基因（抗凝血酶Ⅲ蛋白基因）．過程①是將目的基因導入受體細胞，常用的方法是顯微注射法．
（2）過程②包括早期胚胎培養和胚胎移植技術；來自同一個胚胎的后代具有相同的遺傳物質，因此可用胚胎分割技術獲得多只與該轉基因奶牛遺傳物質相同的牛犢．
（3）若要檢測目的基因是否表達形成相應的蛋白質可采用抗原-抗體雜交技術．
（4）基因表達載體由啟動子、終止子、標記基因和目的基因組成．啟動子位于首端，終止子位于尾端．
故答案為：
（1）PCR        顯微注射法
（2）早期胚胎培養（或“動物細胞培養”） 胚胎移植    胚胎分割
（3）抗原-抗體雜交  
（4）啟動子  終止子

點評 本題考查基因工程和胚胎工程的相關知識，要求考生識記基因工程的原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細節；識記胚胎移植的基本程序和胚胎分割技術的特點，能結合所學的知識準確答題．