我國首例綠色熒光蛋白“轉基因”克隆豬。其中2頭在轉基因性狀上，明顯表達出綠色熒光蛋白的特征，在紫外光源激發下其口、蹄及舌頭可以觀察到明顯的綠色熒光。此次綠色熒光蛋白“轉基因”克隆豬的試驗成功，意味著我國體細胞在下列哪項技術已趨于成熟，這標志著我國在轉基因克隆豬技術研究領域已經步入世界先進水平行列。克隆豬采用的技術有（ ）
A．細胞核移植 B．細胞融合 C．蛋白質工程 D．單克隆抗體
名師點撥卷系列答案
英才計劃期末調研系列答案科目：高中生物 來源：2014屆甘肅秦安一中高三第一次檢測生物卷（解析版） 題型：綜合題
（共12分）下圖表示我國首例綠色熒光蛋白轉基因克隆豬的具體培育過程。
請據圖回答下列問題：
(1)上述過程涉及的現代生物工程技術，屬于分子水平的是___________，其核心步驟是______________________ 。
（2）構建重組DNA分子所用的限制性內切酶作用于圖中的 處，DNA連接酶作用于 處。（填“a”或“b”）,b箭頭指的的是 ，PCR過程斷裂此鍵用 。
(3)若要獲得單個的成纖維細胞進行培養，需用___________處理豬胚胎的部分組織。
(4)E過程中若要獲得大量的卵母細胞需用___________激素處理成年母豬。
(5)H過程的名稱是______ ___，所選擇的胚胎一般處于_______ 期較合適。
(6)經過培養得到早期胚胎后可以用胚胎分割技術以獲得更多基因型______ (相同/不相同)的轉基因克隆豬胚胎，且在進行H過程之前，需要對代孕母豬進行___________處理，以給早期胚胎移入受體提供相同的生理環境。
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科目：高中生物 來源：2014屆浙江省東陽市高三八月月考生物試卷 題型：綜合題
下圖表示我國首例綠色熒光蛋白轉基因克隆豬的具體培育過程。
請據圖回答下列問題：
(1)上述過程涉及的現代生物工程技術，屬于分子水平的是___________，其核心步驟是_______________。
(2)若要獲得單個的成纖維細胞進行培養，需用___________處理豬胚胎的部分組織。
(3)E過程中若要獲得大量的卵母細胞需用___________激素處理成年母豬。
(4)H過程的名稱是______ ___，所選擇的胚胎一般處于_______ 期較合適。
(5)經過培養得到早期胚胎后可以用胚胎分割技術以獲得更多基因型______ (相同/不相同)的轉基因克隆豬胚胎，且在進行H過程之前，需要對代孕母豬進行___________處理，以給早期胚胎移入受體提供相同的生理環境。
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科目：高中生物 來源：2013屆海南省高二下學期期中考試生物試卷（解析版） 題型：綜合題
2008年諾貝爾化學獎授予了三位在研究綠色熒光蛋白（GFP）方面做出突出貢獻的科學家。綠色熒光蛋白能在藍光或紫外光的激發下發出熒光，這樣借助GFP發出的熒光就可以跟蹤蛋白質在細胞內部的移動情況，幫助推斷蛋白質的功能。下圖為我國首例綠色熒光蛋白（GFP）轉基因克隆豬的培育過程示意圖，據圖回答：
注：圖中通過過程①、②形成重組質粒，需要限制性內切酶切取目的基因、切割質粒。限制性內切酶Ⅰ的識別序列和切點是—G↓GATCC—，限制性內切酶Ⅱ的識別序列和切點是—↓GATC—。在質粒上有酶Ⅰ的一個切點，在目的基因的兩側各有1個酶Ⅱ的切點。
（1）在DNA連接酶的作用下，上述兩種不同限制酶切割后形成的黏性末端能否連接起來 ，理由是： 。
（2）過程③將重組質粒導入豬胎兒成纖維細胞時，采用最多的方法是 。
（3）如果將切取的GFP基因與抑制小豬抗原表達的基因一起構建到載體上，GFP基因可以作為基因表達載體上的標記基因，其作用是 。獲得的轉基因克隆豬，可以解決的醫學難題是，可以避免 。
（4）目前科學家們通過蛋白質工程制造出了藍色熒光蛋白，黃色熒光蛋白等，采用蛋白質工程技術制造出藍色熒光蛋白過程的正確順序是： （用數字表示）。
①推測藍色熒光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸
②藍色熒光蛋白的功能分析和結構設計序列
③藍色熒光蛋白基因的修飾（合成）
④表達出藍色熒光蛋白。
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科目：高中生物 來源：2013屆廣東省連州市高二下學期期中考試生物試卷（解析版） 題型：綜合題
日本下村修、美國沙爾菲和美籍華人錢永健因在研究綠色熒光蛋白(GFP)等方面的突出貢獻，獲得2008年度諾貝爾化學獎。下圖為我國首例綠色熒光蛋白(GFP)轉基因克隆豬的培育過程示意圖。據圖回答：
(1)圖中通過過程①、②形成重組質粒，需要限制性核酸內切酶切取目的基因、切割質粒。限制性核酸內切酶I的識別序列和切點是—G↓GATCC—，請畫出質粒被限制酶I切割后所形成的黏性末端：__________________________________________________。
(2)過程③將重組質粒導入豬胎兒成纖維細胞時，采用最多也最有效的方法是________________________________。
(3)如果將切取的GFP基因與抑制小豬抗原表達的基因一起構建到載體上，GFP基因可以作為基因表達載體上的標記基因，其作用是______________________________。
(4)目前科學家們通過蛋白質工程制造出了藍色熒光蛋白、黃色熒光蛋白等，采用蛋白質工程技術制造出藍色熒光蛋白過程的正確順序是(用數字表示)________________________。
①推測藍色熒光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸
②藍色熒光蛋白的功能分析和結構設計序列
③藍色熒光蛋白基因的修飾(合成)
④表達出藍色熒光蛋白
（5）若要在體外擴增綠色熒光蛋白基因可采用PCR技術。標準的PCR過程分為三個步驟，第一步是“變性”,這一步驟如果發生在細胞內，是在 的作用下完成的；第二步是退火；第三步是“延伸”，需要用到 酶。
(6)以上培育過程中應用到的生物技術有_________________________________________等。(至少答出三項)
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科目：高中生物 來源：2010-2011學年上海市嘉定區高三上學期第一次質量調研生物試卷 題型：綜合題
分析回答有關生物工程中的問題：（8分）
日本下村修、美國沙爾菲和美籍華人錢永健因在研究綠色熒光蛋白（GFP）等方面的突出貢獻，獲得2008年度諾貝爾化學獎。下圖為我國首例綠色熒光蛋白（GFP）轉基因克隆豬的培育過程示意圖．據圖回答：
（1）綠色熒光蛋白基因在該實驗中是做為________基因。圖中通過過程①、②形成重組質粒，需要限制性內切酶切取目的基因、切割質粒。限制性內切酶I的識別序列和切點是—G’GATCC—，請畫出質粒被限制酶I切割所形成的黏性末端的過程：________________________
_________。
（2）過程③將重組質粒導入豬胎兒成纖維細胞時，采用最多也最有效的方法是_______________ ___。
(3)如果將切取的GFP基因與抑制小豬抗原表達的基因一起構建到載體上，GFP基因可以作為基因表達載體上的標記基因，其作用是_______________________。
(4)目前科學家們通過蛋白質工程制造出了藍色熒光蛋白，黃色熒光蛋白等，采用蛋白質工程技術制造出藍色熒光蛋白過程的正確順序是（用數字表示）：_______ ___ 。
①推測藍色熒光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸②藍色熒光蛋白的功能分析和結構設計③藍色熒光蛋白基因的修飾（合成）④表達出藍色熒光蛋白。
(5)在培養重組細胞時，培養液中通常含有_____________、氨基酸、無機鹽、維生素和動物血清等。
(6)以上培育過程中應用到的生物技術有_________________________________等（至少答出三項）。
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