Question

13．人生成激素（hGH）可以刺激身體生長，在臨床上有重要應用，hGH來源十分有限，起初只能從人尸體的腦垂體中提取，遠不能滿足臨床用藥要求．現代基因工程為該激素的生產帶來了生機，下圖為通過體外大量培養微生物來大量產出人生長激素（hGH）的過程．據圖回答下列問題：

（1）過程①為逆轉錄，需要逆轉錄酶的催化．
（2）過程②為基因表達載體的構建，需要的工具為限制酶和DNA連接酶，該過程形成的結構a中除圖中所示部分外至少還應包括啟動子和終止子．
（3）為提高過程③的轉化效率，需要用Ca²⁺處理大腸桿菌．該過程中所用的受體大腸桿菌中至少不應含有抗生素B抗性基因，這樣在過程④初次篩選時可將培養基中加抗生素B，存活下來的大腸桿菌只有2種，以便進行進一步篩選．
（4）轉基因大腸桿菌培育成功的標志是大腸桿菌細胞內合成了人生長激素．

Answer 1

分析 根據題意和圖示分析可知：①表示獲取目的基因，②表示構建基因表達載體，③表示導入受體細胞，④表示微生物的分離，⑤表示微生物的培養，⑥表示純化獲得人生成激素（hGH）．

解答 解：（1）過程①表示通過mRNA為模板，在逆轉錄酶的催化作用下，進行逆轉錄獲取目的基因．
（2）過程②是將目的基因與質粒進行重組，為基因表達載體的構建，需要限制酶和DNA連接酶．該過程形成的結構a中除圖中所示的標記基因外，至少還應包括啟動子和終止子．
（3）為提高過程③的轉化效率，需要用Ca²⁺處理大腸桿菌，使其成為感受態細胞．由于目的基因插入到抗生素A抗性基因中，破壞了抗生素A抗性基因，使其不能表達，這樣在過程④初次篩選時可將培養基中加抗生素B，存活下來的大腸桿菌只有導入了普通質�；蛑亟M質粒2種，以便進行進一步篩選．
（4）轉基因大腸桿菌培育成功的標志是大腸桿菌細胞內合成了人生長激素．
故答案為：
（1）逆轉錄    逆轉錄酶
（2）基因表達載體的構建    限制酶和DNA連接酶    啟動子和終止子
（3）Ca²⁺   抗生素B抗性   2
（4）大腸桿菌細胞內合成了人生長激素

點評 本題考查基因工程的相關知識，意在考查學生的識圖能力和判斷能力，運用所學知識綜合分析問題的能力．