Question

（14分）綠色熒光蛋白基因（GFP）被發現以來，一直作為一個監測完整細胞和組織內基因表達及蛋白質位置的理想標記。請根據圖表回答下列問題。

（1）若圖中GFP的M端伸出的核苷酸的堿基序列是—TCGA，N端伸出的核苷酸的堿基序列是—TGCA，則在構建含該GFP的重組質粒A時，應選用的限制酶是                 。③過程需要的酶是             。

（2）檢測GFP是否已重組到豬胎兒成纖維細胞的染色體DNA上，可采用               技術進行檢測。

（3）用顯微鏡可觀察到用于⑥過程的豬卵母細胞的卵黃膜和透明帶之間有         個極體。用于⑤過程的豬胎兒成纖維細胞，一般選用傳代10代以內的細胞，原因是                                     。

（4）由⑦過程獲得的重組細胞培育成綠色熒光轉基因克隆豬，涉及到的現代生物技術手段有                                              。

（5）為了加快繁殖速度，可采用胚胎分割的方法。得到綠色熒光轉基因克隆豬（雌性）之后，可用                       處理，使之超數排卵，提高其繁育能力。

 

Answer 1

【答案】

（14分，每空2分）(1)HindⅢ和PstⅠ    DNA連接酶     

（2）DNA分子雜交  （3）1   10代以內的細胞保持正常的二倍體核型   

（4）早期胚胎培養和胚胎移植（缺一不得分）   （5）促性腺激素

【解析】從圖示可知，運載體是用HindⅢ和PstⅠ切割，所以目的基因也必須使用相同的限制酶切割，具有相同的粘性末端，用DNA連接酶把目的基因和運載體相連，目的基因是否導入通常利用DNA雜交技術來獲得，沒有完成受精作用的次級卵母細胞有一個極體，一般用于核移植的細胞的細胞核通常選用傳代10代以內的細胞，是因為10代以內的細胞保持正常的二倍體核型，動物基因工程通常是導入受精卵中的在體外涉及動物細胞的培養成早期胚胎，再通過胚胎移植到母體內發育，利用促性腺激素對受體和供體通常采用同期發情處理，使之超數排卵，提高其繁育能力便于移植成功。