Question

18．研究小組用土壤農桿菌與陸地棉葉肉細胞原生質體共同培養獲得了轉基因陸地棉，過程如下．請回答下列問題．

（1）圖a表示從已經消毒的葉片中剪取部分植物組織細胞．圖b表示制備原生質體，培養皿中要加纖維素酶和果膠酶，其原因是植物細胞壁的主要成分是纖維素和果膠，纖維素酶和果膠酶可除去細胞壁．
（2）圖c表示用培養基培養原生質體，培養基中加入了適宜濃度的蔗糖，其主要作用是為原生質體提供碳源和能源和調節滲透壓維持原生質體的形狀．培養一段時間后，將其與土壤農桿菌混合培養，使重組Ti質粒進入原生質體（植物細胞）．重組Ti質粒上T-DNA段攜帶了目的基因，可以整合到植物細胞的染色體（染色體DNA）上．然后通過離心（圖d）的方法，除去多余的土壤農桿菌．
（3）圖e表示將原生質體培養成愈傷組織，然后將其轉移到含有一定抗生素的培養基中進行培養（圖f），抗生素的作用是篩選出含目的基因的植物細胞．
（4）將愈傷組織轉移培養基繼續培養（圖g），同時注意調整植物生長調節劑的種類和含量，其原因是植物生長調節劑的種類和含量會影響愈傷組織的分化．最終獲得完整的植株（圖h）．

Answer 1

分析 分析題圖：圖示是通過土壤農桿菌與植物細胞原生質體共培養的方法獲得轉基因植物的過程．a獲取植物細胞；b、為去除細胞壁獲取原生質體的過程；c、用游離的培養基培養原生質體；d為土壤農桿菌與植物細胞原生質體共培養；e表示脫分化過程；f表示用選擇培養基進行篩選培養；g表示再分化過程；h表示轉基因植物幼苗．據此答題．

解答 解：（1）圖b表示用纖維素酶和果膠酶兩種酶來制備原生質體，原因是植物細胞壁的主要成分是纖維素和果膠，纖維素酶和果膠酶可除去細胞壁．
（2）圖c表示用培養基培養原生質體，培養基中加入了適宜濃度的蔗糖，其主要作用是為原生質體提供碳源和能源和調節滲透壓維持原生質體的形狀，將其與土壤農桿菌共同培養，使攜帶目的基因的Ti質粒的T-DNA進入植物細胞，整合到植物細胞的染色體（染色體DNA），然后通過離心的方法，除去多余的土壤農桿菌．
（3）圖e表示將原生質體培養成愈傷組織，然后將其轉移到含有一定抗生素的培養基中進行培養（圖f），抗生素的作用是篩選出含目的基因的植物細胞．
（4）植物生長調節劑的種類和含量會影響愈傷組織的分化，故將愈傷組織轉移培養基繼續培養（圖g），同時注意調整植物生長調節劑的種類和含量
故答案為：
（1）植物細胞壁的主要成分是纖維素和果膠，纖維素酶和果膠酶可除去細胞壁
（2）為原生質體提供碳源和能源　　調節滲透壓維持原生質體的形狀　　原生質體（植物細胞）　T-DNA　　染色體（染色體DNA）
（3）篩選出含目的基因的植物細胞
（4）植物生長調節劑的種類和含量會影響愈傷組織的分化

點評 本題考查基因工程、植物細胞工程，要求考生識記基因工程的原理、工具及操作步驟；識記植物體細胞雜交和植物組織培養的過程，能準確判斷圖中各過程的含義，再結合所學的知識答題