Question

19．下面是月季花藥培養產生花粉植株的兩種途徑，請回答：
途徑1：花藥中的花粉$\stackrel{脫分化}{→}$①$\stackrel{分化}{→}$叢芽$\stackrel{誘導}{→}$生根→移栽
途徑2：花藥中的花粉$\stackrel{脫分化}{→}$愈傷組織$\stackrel{再分化}{→}$叢芽$\stackrel{誘導}{→}$生根→移栽
（1）途徑1和途徑2沒有絕對的界限，主要取決于培養基中激素的種類及其濃度配比．途徑1中的①為胚狀體．經途徑2形成的花粉植株，染色體組的數目（染色體數）常常會發生變化，因此還需要對培養出來的植株作進一步的鑒定和篩選．
（2）一般說來，單核（單核靠邊）期的花藥培養成功率最高．選擇花藥時，一般要通過鏡檢來確定其中的花粉是否處于適宜的發育期．某品種月季的花粉細胞核不易著色，操作時應先在卡諾氏（固定）液中處理20min，取出放在載玻片上，加焙花青-鉻礬溶液染色，蓋上蓋玻片后再普通光學顯微鏡下檢查．剝離花藥接種時，要盡量比u損傷花藥，否則接種后容易從受傷部位產生愈傷組織．
（3）試驗中發現愈傷組織被真菌污染，試驗人員做了探究培養基滅菌時間與污染率關系的實驗，結構如圖所示：據圖可初步判斷：隨培養基滅菌時間的延長，污染率在一定范圍內波動（污染率變化不大），可見，污染不是培養基滅菌時間造成的．

Answer 1

分析 1、在植物組織培養時，通過調節生長素和細胞分裂素的比值能影響愈傷組織分化出根或芽．因此從愈傷組織形成完整植株的途徑有兩條，具體通過那一條途徑主要取決于培養基成分中激素的種類及其濃度配比；由花粉離體培養得到的是植株是單倍體植株，這也說明成熟花粉細胞具有全能性．
2、通常選擇植物單核期的花藥培養成功率最高．花藥取樣后通常用醋酸洋紅法染成紅色鏡檢，對不易著色的則用焙花青-鉻礬法對其染色，顏色是藍黑色．
3、植物組織培養：
（1）過程：離體的植物組織，器官或細胞（外植體）→脫分化愈傷組織→再分化胚狀體→植株（新植體）．決定植物脫分化和再分化的關鍵因素是植物激素的種類和比例，特別是生長素和細胞分裂素的協同作用在組織培養過程中非常重要．
（2）原理：植物細胞的全能性．
4、在離體的植物器官、組織或細胞脫分化形成愈傷組織的過程中，需要的條件：①消毒滅菌；②一定濃度的植物激素；③適宜的溫度；④充足的養料．

解答 解：（1）圖示產生花粉植株第一種途徑是花粉經過胚狀體階段再發育成叢芽，第二種途徑是花粉在誘導培養基上先形成愈傷組織階段再發育成叢芽，叢芽經誘導生根再形成植株，圖示兩種產生花粉植株的途徑并沒有絕對的界限，主要取決于培養基中激素的種類及其濃度配比．經途徑2形成的花粉植株，染色體組的數目（染色體數）常常會發生變化，因此還需要對培養出來的植株作進一步的鑒定和篩選．
（2）粉植株的培養中，選擇合適的花粉發育時期是提高誘導成功率的重要因素，花粉應選擇細胞核由中央移向一側的單核期，此時花藥培養成功率高．花藥取樣后通常用醋酸洋紅法染色鏡檢，對不易著色的某品種月季的花粉細胞核不易著色，操作時應先在卡諾氏（固定）液處理20min，取出放在載玻片上，加焙花青-鉻礬溶液對其染色．剝離花藥接種時，要盡量不損傷花藥，否則接種后容易從受傷部位產生愈傷組織
（3）圖可初步判斷：隨培養基滅菌時間的延長，污染率在一定范圍內波動（污染率變化不大），可見，污染不是培養基滅菌時間造成的．
故答案為：
（1）激素的種類及其濃度配比   胚狀體   染色體組的數目（染色體數）
（2）單核（單核靠邊）   卡諾氏（固定）液   焙花青-鉻礬   愈傷組織
（3）污染率在一定范圍內波動（污染率變化不大）

點評 本題結合培養花粉植株的兩種途徑流程圖，考查月季花藥離體培養的相關知識，重點考查花藥離體培養的過程和條件，只要考生記住相關知識點即可得出正確答案，屬于考綱識記層次的考查，這需要考生在平時的學習過程中注意構建知識網絡體系．還要知道，確定花粉發育時期最常用的方法是醋酸洋紅法，但是對于花粉細胞核不易著色的植物，需采用焙花青-鉻礬法．