Question

(附加題10分) 基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和質粒，便于重組和篩選。已知限制酶I的識別序列和切點是—G^↓GATCC— ，限制酶II的識別序列和切點是—^↓GATC—; Gene I是抗氨芐青霉素基因，Gene II是抗四環素基因。根據圖示回答下列問題：

（1）用限制酶II切割DNA后得到的是兩個          末端。限制酶I剪切得到的一個末端可以畫為                            。

（2）本實驗中若要得到符合要求的重組質粒，應該用       切割質粒，用       切割目的基因。然后用              處理混合物得到重組質粒。

（3）把重組質粒導入動物細胞的方法一般是              。要把成功導入目的基因的受體細胞篩選出來，應該將細胞放在含有              的培養基中選擇培養。

（4）不同生物的基因可以拼接的原因是                            。

 

Answer 1

【答案】

（1）黏性末端  

（2）限制酶I            限制酶II    DNA連接酶

（3）顯微注射法                     氨芐青霉素

（4）它們的DNA都是由4種脫氧核糖核苷酸構成的雙螺旋結構（有相似的DNA結構）

【解析】（1）根據限制酶II的識別序列，切割DNA后能夠得到2個黏性末端。

（2）限制酶II能夠識別限制酶I的識別序列，所以切割質粒選擇限制酶I，切割目的基因選擇限制酶II。構建重組質粒需要DNA連接酶處理。

（3）將重組質粒導入動物細胞的方法一般是顯微注射法，質粒中標記基因是氨芐青霉素基因，可用含氨芐青霉素的培養基來選擇導入目的基因的受體細胞。

（4）由于不同生物的DNA都是由4種脫氧核糖核苷酸構成的雙螺旋結構，所以不同生物的基因可以拼接。