Question

【題目】請回答基因工程相關問題：

（1）基因工程的四個基本操作步驟：獲取目的基因、_______、將目的基因導入受體細胞、目的基因檢測與鑒定；獲取目的基因的兩條途徑為______和_______。

（2）在基因表達載體中，啟動子是_______聚合酶識別和結合的部位。若將真核基因在原核細胞中表達，對該目的基因的基本要求是________；在獲得轉基因奶牛時，將基因表達載體導入受體細胞所采用的方法是________。

（3）假設以大腸桿菌質粒作為運載體，并以同一種限制性內切酶切割運載體與目的基因將切割后的運載體與目的基因片段混合，并加入DNA連接酶。連接產物至少有__________種環狀DNA分子，它們分別是____________。

Answer 1

【答案】基因表達載體的構建 從生物材料中分離 人工合成 RNA 除去內含子 顯微注射法 3 運載體自連、目的基因片段自連、運載體與目的基因片段相連的環狀DNA分子

【解析】

該題主要考察了基因工程的基本過程，基因工程包含四個步驟，分別是獲取目的基因、基因表達載體的構建、將目的基因導入受體細胞、目的基因檢測與鑒定。真核細胞中的基因和原核細胞中的基因差別在內含子的表達上，啟動子是進行轉錄開始的起點。

（1）基因工程的四步基本操作為獲取目的基因、基因表達載體的構建、將目的基因導入受體細胞、目的基因檢測與鑒定；獲取目的基因的兩個方法分別為從目標生物體內獲取，或人工合成；

（2）啟動子是轉錄開始的信號位點，因此是RNA聚合酶的結合位點；由于原核細胞中缺少對內含子轉錄出的片段進行修飾的能力，所以需要在基因中去除內含子；動物細胞進行基因表達載體的導入時，常常選擇顯微注射法；

（3）同一種限制酶切割基因片段后得到的黏性末端相同，所以加入DNA連接酶后，相同的黏性末端都有可能連接到一起，因此可能產生三種連接情況，分別為運載體自連、目的基因片段自連、運載體與目的基因片段相連的環狀DNA分子。