Question

（12分）科學家將魚抗凍蛋白基因轉入番茄，使番茄植株的耐寒能力大大提高，可以在相對寒冷的環境中生長。質粒上有Pst I 、Sma I 、Hind III 、Alul 等四種限制酶切割位點，下圖是轉基因抗凍番茄培育過程的示意圖（amp^r為抗氨芐青霉素基因），其中①—④是轉基因抗凍番茄培育過程中的相關步驟，I 、II 表示相關結構或細胞。請據圖作答：

（l）基因工程的核心是_______________________________。
(2)構建基因表達載體時，可用一種或多種限制酶進行切割。為了避免目的基因和載體在酶切后產生的末端發生任意連接，在此實例中，應該選用                酶，分別對目的基因和質粒進行切割，切割后產生的DNA 片段分別為      種和      種。
（3）要篩選已導入含魚的抗凍蛋白基因的番茄細胞,應首先選擇含                     的培養基中篩選番茄組織細胞。
（4）研究人員通常采用                       法將魚抗凍蛋白基因導入番茄細胞內.
(5)基因工程操作中的第四步是目的基因的檢測與鑒定,在分子水平檢測目的基因是否翻譯形成了相應的蛋白質通常采用   __________   技術，。采用   __________ 方法在個體生物學水平上檢測目的基因是否表達。
(6)圖中③④分別指的是           、           ,欲獲得人工種子應培養到___________階段。將II細胞培養成完整植物體所用技術的理論基礎是___________________________。

Answer 1

(1) 基因表達載體的構建
(2) PstI和SmaI   4、2 
(3)氨芐青霉素
(4)農桿菌轉化(或基因槍法等，答案合理即給分)
(5) 抗原--抗體雜交   低溫培養
（6）脫分化 再分化 胚狀體 植物細胞的全能性

解析