Question

12．請回答有關基因工程的相關問題
（1）基因工程的核心步驟基因表達載體構建．
（2）將目的基因導入動物細胞中方法顯微注射法．
（3）目的基因是否在受體細胞中的表達，分子水平的檢測是抗原抗體雜交技術．
（4）標記基因的作用是篩選含目的基因的受體細胞（供重組DNA選擇和鑒定）．
（5）農桿菌Ti質粒有T-DNA序列，能帶著目的基因整合到受體細胞的染色體的DNA上．

Answer 1

分析 基因工程技術的基本步驟：
（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成．
（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等．
（3）將目的基因導入受體細胞：根據受體細胞不同，導入的方法也不一樣．將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態細胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：（1）基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲取；②基因表達載體的構建；③將目的基因導入受體細胞；④目的基因的檢測與表達．其中核心步驟是：基因表達載體構建．
（2）將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法．
（3）檢測目的基因是否在受體細胞中的表達，常用抗原抗體雜交技術．
（4）標記基因的作用是篩選含目的基因的受體細胞（供重組DNA選擇和鑒定）．
（5）農桿菌Ti質粒有T-DNA序列，能帶著目的基因整合到受體細胞的染色體的DNA上．
故答案為：
（1）基因表達載體構建
（2）顯微注射法
（3）抗原抗體雜交技術
（4）篩選含目的基因的受體細胞（供重組DNA選擇和鑒定）
（5）T-DNA

點評 本題考查基因工程的相關知識，要求考生識記基因工程的原理、操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細節，能結合所學的知識準確答題．