Question

8．葉綠體轉(zhuǎn)基因技術(shù)是將外源基因整合到葉綠體基因組中，該技術(shù)能有效改良植物的品質(zhì)．請(qǐng)回答：
（1）轉(zhuǎn)基因技術(shù)的核心步驟是構(gòu)建基因表達(dá)載體，完成該步驟所需要的酶有限制酶和DNA連接酶．
（2）將植物體細(xì)胞用纖維素酶或果膠酶處理得到原生質(zhì)體，再通過(guò)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法或基因槍法法，將目的基因?qū)�入原生質(zhì)體，使原生質(zhì)體再生出細(xì)胞壁之后，通過(guò)植物組織培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)可得到相應(yīng)的轉(zhuǎn)基因幼苗．

Answer 1

分析 1、基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲取；②基因表達(dá)載體的構(gòu)建（核心步驟）；③將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞；④目的基因的檢測(cè)與表達(dá)．
2、植物體細(xì)胞雜交的過(guò)程：

解答 解：（1）基因工程的核心步驟是基因表達(dá)載體的構(gòu)建；構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)首先需要限制酶切割含有目的基因的外源DNA和運(yùn)載體，其次還需要用DNA連接酶將目的基因與運(yùn)載體連接形成重組DNA．
（2）植物細(xì)胞壁的主要成分是纖維素和果膠，根據(jù)酶的專一性原理，將植物體細(xì)胞用纖維素酶或果膠酶處理得到原生質(zhì)體，再通過(guò)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法或基因槍法，將目的基因?qū)�入原生質(zhì)體，使原生質(zhì)體再生出細(xì)胞壁之后，通過(guò)植物組織培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)可得到相應(yīng)的轉(zhuǎn)基因幼苗．
故答案為：
（1）構(gòu)建基因表達(dá)載體  限制酶和DNA連接酶　　
（2）纖維素酶或果膠酶　　農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法或基因槍法　　植物組織培養(yǎng)

點(diǎn)評(píng) 本題考查基因工程和植物細(xì)胞工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的原理、操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)；識(shí)記植物體細(xì)胞雜交的過(guò)程及植物組織培養(yǎng)技術(shù)的相關(guān)應(yīng)用，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題．